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| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Furlaneto, Márcia Cristina [Orientador] | - |
| Autor(es): dc.creator | Oliveira, Marcelo Tempesta | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-05-15T12:59:02Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-05-15T12:59:02Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-05-01 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-05-01 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2025-05-15 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2025-05-15 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://repositorio.uel.br/handle/123456789/10981 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/978194 | - |
| Descrição: dc.description | Resumo: Este trabalho descreve o estabelecimento de um sistema de transformação eficiente para as espécies de leveduras oportunistas Candida albicans, C tropicalis e C glabrata, importantes patógenos humanos, pelo emprego da metodologia de transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens As células fúngicas foram transformadas em diferentes condições de co-cultivo utilizando o vetor binário pBTS-4, que contém o gene de resistência ao antibiótico Higromicina B (hph) como marcador de seleção Nossos resultados indicam uma freqüência de transformação para C albicans, C tropicalis e C glabrata de até 1471, 1612 e 83 transformantes obtidos por co-cultivo, respectivamente Após quatro repiques em meio não seletivo, todos os transformantes analisados cresceram quando expostos novamente ao meio de seleção, sendo desta forma 1% estáveis mitóticamente A PCR e o dot-blot confirmaram molecularmente a transformação das espécies de Candida, gerando o produto de amplificação esperado de 6pb, e hibridado positivamente com os transformantes quando o mesmo foi utilizado como sonda A habilidade da linhagem AGL-1 em aderir às células fúngicas nas condições de co-cultivo foi observada através do emprego de microscopia eletrônica de varredura e transmissão A reprodutibilidade do sistema de transformação descrito neste trabalho pode fornecer um método para a manipulação genética destes patógenos que irá facilitar a análise molecular detalhada destas espécies fúngicas | - |
| Descrição: dc.description | Dissertação (Mestrado em Microbiologia) - Universidade Estadual de Londrina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Microbiologia | - |
| Descrição: dc.description | Abstract: This paper describes the establishment of an efficient transformation system for the opportunistic yeasts species C albicans, C tropicalis and C glabrata, by the employment the Agrobacterium-mediated transformation method (AMT) Yeast cells were transformed to hygromycin B resistance using the binary vector pBTS4 carrying a hygromycin B resistance gene (hph) as a selection marker under different co-cultivation conditions Overall, our data indicate a transformation frequency of up to 1472, 1612 and 83 transformants/co-cultivation for C albicans, C tropicalis and C glabrata, respectively Following 4 serial passages of transformants on non-selective medium, 1% of the transformants were found to be mitotically stable for the selection mark PCR and dot-blot targeted at a 6 bp fragment from hph gene confirmed the transformation of Candida species The ability of Agrobacterium strain AGL-1 to attach to Candida cells under co-cultivation was analysed under scanning and transmission electron microscopy The reproducible transformation system described in this work may provide a method for the genetic manipulation of these pathogens, which will facilitate detailed molecular analysis of these fungal species | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Idioma: dc.language | pt_BR | - |
| Relação: dc.relation | Mestrado | - |
| Relação: dc.relation | Microbiologia | - |
| Relação: dc.relation | Centro de Ciências Biológicas | - |
| Relação: dc.relation | Programa de Pós-Graduação em Microbiologia | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Candida | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Genética microbiana | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Transformação bacteriana | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Agrobacterium | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Microbial genetics | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Bacterial transformation | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Agrobacterium | - |
| Título: dc.title | Transformação genética de Candida spp via Agrobacterium tumefaciens | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional da UEL - RIUEL | |
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