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Micro-esponjas como biomaterial para o estudo da inflamação crônica, antígeno específico, em animais sensibilizados e tolerizados
Use este link compartilhar ou citar este material: http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/920565
Registro completo de metadados
| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Teixeira, Gerlinde Agate Platais Brasil | - |
| Autor(es): dc.contributor | Paiva, Luciana Souza de | - |
| Autor(es): dc.contributor | Pedruzzi, Monique de Moraes Bitteti | - |
| Autor(es): dc.contributor | Verícimo, Mauricio Afonso | - |
| Autor(es): dc.contributor | Kanashiro, Milton Masahiko | - |
| Autor(es): dc.contributor | Freitas, William Rodrigues de | - |
| Autor(es): dc.creator | Rodrigues, Sónia Kristy Pinto Melo | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-01-03T11:43:36Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-01-03T11:43:36Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-10-07 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-10-07 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://app.uff.br/riuff/handle/1/34938 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/920565 | - |
| Descrição: dc.description | INTRODUÇÃO: O campo de estudo dos biomateriais é multidisciplinar e se baseia em conceitos tanto das engenharias como das ciências da Vida. Embora seja muito antiga (Sec XVI), a ideia de correção de tecidos lesados através da substituição, é somente a partir da década de 1940 que se observa um interesse crescente na pesquisa deste assunto (cerca de 175.000 artigos no Pubmed) e é a partir da década de 1980 que encontramos artigos associando o uso de biomateriais e a resposta imunológica (em torno de 3300). Atualmente biomaterial é definido como "material destinado a interagir com sistemas biológicos para avaliar, tratar, aumentar ou substituir qualquer tecido, órgão ou função do corpo". Para fornecerem um ambiente apropriado para a interação organismo-biomaterial os biomateriais precisam ser suportes (scaffolds) porosos. Cerâmicas, polímeros sintéticos e polímeros naturais são os três principais tipos de biomateriais utilizados como suporte para a interação organismo biomaterial. Assim os biomateriais não só interagem com o corpo, mas são utilizados para influenciar e testar processos biológicos. OBJETIVO: Determinar micro e macroscopicamente a cinética da resposta imunológica a implantes de esponja adsorvidos com proteínas heterólogas em animais previamente tolerizados ou sensibilizados com a respectiva proteína. MATERIAL E MÉTODOS: Camundongos fêmeas C57/BL6 foram divididos em 8 grupos experimentais e um grupo controle negativo (contendo n=12 cada grupo). Foram realizadas as seguintes etapas: Etapa 1 -Tolerização: Grupos Tolerantes - os animais receberam como opção para beber água e clara de ovo adocicada por 5 dias Grupos não Tolerantes os animais receberam apenas água para beber. Etapa 2 sensibilização: metade de cada grupo recebeu 200L de ovalbumina (OVA) contendo 1mg de Al(OH)3 a outra metade recebeu por via subcutânea 200L de salina contendo 1mg de Al(OH)3. Etapa 3 implante: os animais de cada um dos grupos foram divididos em novos grupos e implantados na região interescapular com três micro-esponjas. Sub-grupos a) micro-esponjas previamente adsorvidas com OVA; b) micro esponjas previamente adsorvidas com OVA e soro autólogo; e c) micro-esponja previamente adsorvidas com soro autólogo; d) micro-esponja previamente adsorvida com salina. O término dos experimentos, se dará com a retiradas das micro-esponjas após 10 e 35 dias pós-implante. Para tal, os animais receberam uma dose letal de anestésico. Antes da retirada da micro-esponja foi registrado o aspecto macroscópico do entorno. Após a sua retirada esta foi fixada em Formalina de Carson 10% e processada para HE e Alcian Blue. Para estatística utilizamos ANOVA Two-way com pós-teste de Bonferroni considerando n=6 (para cada tempo de retirada) e significância de p<0,05. RESULTADOS: Nos gráficos apresentados demonstramos que a proteína adsorve a micro-esponja por dois mecanismos. Um de forma direta, ou seja, as esponjas incubadas na solução de Lowry demonstram a presença de proteína e outra de forma indireta a quantidade de proteína na solução contendo OVA antes e depois da incubação das esponjas é significativamente diferente. Observamos uma diminuição proporcional na quantidade de proteína encontrada, após a incubação. Não ocorre apenas a redução do volume da solução proteica. Demonstramos também que ao lavar em uma solução com pH neutro não removemos quantidades significativas da proteína quando esta está saturada, ou seja, nas duas concentrações mais elevadas. Todos os animais de todos os grupos ganharam peso ao longo do experimento. Observamos que todos os grupos ficaram sensibilizados à micro-esponja. Tanto grupos tolerantes como os sensibilizados tiveram menos células no interior das esponjas implantadas por 10 dias em relação aos grupos com 35 dias de implante. O Soro Autólogo não interferiu na quantidade de células que ficaram presentes no interior das esponjas. Todos os grupos que tiveram as esponjas retiradas após 35 dias não apresentaram formação de cápsulas ao entorno da micro-esponja. CONCLUSÃO: todos os grupos com retirada da micro-esponja após 10 de implante apresentaram menor número de células no seu interior. A adsorção com soro autólogo não interferiu de forma significativa na quantidade de células, após 10, ou 35 dias de implante das micro-esponjas. A análise histomorfométriacas dos diferentes grupos de tratamento demonstrou variações temporais maiores do que as variações determinadas pelo perfil da experiencia prévia aos antígenos adsorvidos às esponjas | - |
| Descrição: dc.description | INTRODUCTION: The field of biomaterials study is multidisciplinary and is based on concepts from both engineering and life sciences. Although it is very ancient (16th century), the idea of tissue repair through replacement only gained significant interest in research from the 1940s onwards (about 175,000 articles on PubMed). It was not until the 1980s that articles associating the use of biomaterials and the immune response began to emerge (around 3,300 articles). Currently, biomaterial is defined as "material intended to interact with biological systems to assess, treat, augment, or replace any tissue, organ, or body function." To provide an appropriate environment for organism-biomaterial interaction, biomaterials need to be porous scaffolds. Ceramics, synthetic polymers, and natural polymers are the three main types of biomaterials used as support for organism-biomaterial interaction. Thus, biomaterials not only interact with the body but are also used to influence and test biological processes.OBJECTIVE: To determine micro and macroscopically the kinetics of the immune response to sponge implants adsorbed with heterologous proteins in animals previously tolerized or sensitized with the respective protein. MATERIALS AND METHODS: Female C57/BL6 mice were divided into 8 experimental groups and one negative control group (containing n=12 each group). The following steps were performed: Step 1 - Tolerization: Tolerant Groups - animals were given the option to drink sweetened water and egg white for 5 days. Non-tolerant Groups - animals were given only water to drink. Step 2 - Sensitization: half of each group received 200μL of ovalbumin (OVA) containing 1mg of Al(OH)3, and the other half received subcutaneously 200μL of saline containing 1mg of Al(OH)3. Step 3 - Implantation: animals from each group were divided into new groups and implanted in the interscapular region with three micro sponges. Sub-groups a) micro sponges previously adsorbed with OVA; b) micro sponges previously adsorbed with OVA and autologous serum; c) micro sponges previously adsorbed with autologous serum; d) micro sponges previously adsorbed with saline. The experiments will conclude with the removal of the micro sponges after 10 and 35 days post-implantation. For this, the animals received a lethal dose of anesthetic. Before removing the micro sponges, the macroscopic aspect of the surroundings was recorded. After removal, they were fixed in 10% Carson Formalin and processed for HE and Alcian Blue staining. For statistics, we used Two-way ANOVA with Bonferroni post-test considering n=6 (for each withdrawal time) and significance of p<0.05. RESULTS: The graphs presented demonstrate that the protein adsorbs to the micro sponge by two mechanisms. One directly, meaning sponges incubated in the Lowry solution show the presence of protein, and another indirectly, the amount of protein in the solution containing OVA before and after sponge incubation is significantly different. We observed a proportional decrease in the amount of protein found after incubation. Not only does the volume of the protein solution decrease, but we also demonstrated that washing in a neutral pH solution does not remove significant amounts of protein when it is saturated, i.e., at the two highest concentrations. All animals in all groups gained weight throughout the experiment. We observed that all groups were sensitized to the micro sponge. Both tolerant and sensitized groups had fewer cells inside the implanted sponges at 10 days compared to groups with 35 days of implantation. Autologous Serum did not interfere with the quantity of cells present inside the sponges. All groups that had the sponges removed after 35 days showed no capsule formation around the micro sponge.CONCLUSION: All groups with sponge removal after 10 days of implantation showed a lower number of cells inside. Adsorption with autologous serum did not significantly interfere with the quantity of cells after 10 or 35 days of micro sponge implantation. Histomorphometric analysis of the different treatment groups demonstrated greater temporal variations than variations determined by the profile of previous antigen experiences adsorbed to the sponges. | - |
| Descrição: dc.description | 138 f. | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Idioma: dc.language | pt_BR | - |
| Direitos: dc.rights | Open Access | - |
| Direitos: dc.rights | CC-BY-SA | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Biomaterial | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Micro-esponja de poliéster-uretano | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Inflamação | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Biomaterial | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Tolerância imunológica | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Inflamação | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Produção intelectual | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Biomaterial | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Polyester-urethane Micro-sponge | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Immunological Tolerance | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Inflammation | - |
| Título: dc.title | Micro-esponjas como biomaterial para o estudo da inflamação crônica, antígeno específico, em animais sensibilizados e tolerizados | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | Tese | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense - RiUFF | |
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