Desenvolvimento de sistema baseado na produção de GFP dependente de densidade celular para a detecção e triagem funcional de genes com atividade antibacteriana

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorKrüger, Ricardo Henrique-
Autor(es): dc.creatorAraújo Júnior, Samuel Dias-
Data de aceite: dc.date.accessioned2024-10-23T16:10:45Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2024-10-23T16:10:45Z-
Data de envio: dc.date.issued2020-01-22-
Data de envio: dc.date.issued2020-01-22-
Data de envio: dc.date.issued2020-01-22-
Data de envio: dc.date.issued2014-02-26-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://repositorio.unb.br/handle/10482/36200-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/901740-
Descrição: dc.descriptionDissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Celular, Pós-Graduação em Biologia Microbiana, 2014.-
Descrição: dc.descriptionVários estudos demonstram que a clonagem e expressão de enzimas e compostos bioativos utilizando a abordagem metagenômica é uma ótima alternativa para a exploração funcional de microrganismos ainda não cultiváveis. A detecção de clones com atividade antimicrobiana pode ser realizada atualmente por meio de visualização direta por alteração fenotípica do clone, como pigmentação e morfologia da colônia ou formação de halo de inibição quando realizado ensaios de sobreposição contra microrganismos indicadores. Essas estratégias já identificaram clones metagenômicos com atividade antimicrobiana, mas demonstraram, mesmo utilizando diversos hospedeiros, baixa resolução e sensibilidade, indicando a necessidade de métodos de triagem mais robustos para limites inferiores de detecção. Neste estudo é relatado o desenvolvimento de um sistema de detecção de atividade antibacteriana baseado na produção de fluorescência, por meio da expressão do gene gfp, decorrente à ativação por moléculas homoserina lactonas (HSL), que estão diretamente relacionadas à densidade celular da bactéria produtora utilizada no ensaio antibacteriano. Essa metodologia, denominada CEDDEX, apresentou sensibilidade significantemente superior quando comparada aos métodos tradicionais de triagem, além de poder ser executada de maneira relativamente simples em um curto período de dias e com um baixo custo operacional.-
Descrição: dc.descriptionSeveral studies demonstrate that the cloning and expression of enzymes and bioactive compounds utilizing the metagenomics approach is a great alternative for the functional exploitation of microorganisms not-yet cultivable. The detection of clones with antimicrobial activity can currently be performed through direct visualization by phenotypic alteration clone as pigmentation and colony morphology or formation of inhibition zone when performed overlay assays versus indicator microorganisms. Those strategies have already identified metagenomic clones with antimicrobial activity, but demonstrated, even using different hosts, low resolution and sensitivity, indicating the need for more robust methods of screening for lower detection limits. In this study is reported the development of an antibacterial activity detection system based in the production of fluorescence by the expression of the gfp gene due to activation molecules homoserine lactone (AHL), which are directly related to cell density of the producing bacterium used the antibacterial assay. This methodology, denominated CEDDEX, showed significantly higher sensitivity when compared to traditional methods of screening, and can be performed relatively easily in a short period of days and at a low operational cost.-
Descrição: dc.descriptionInstituto de Ciências Biológicas (IB)-
Descrição: dc.descriptionDepartamento de Biologia Celular (IB CEL)-
Descrição: dc.descriptionPrograma de Pós-Graduação em Biologia Microbiana-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Direitos: dc.rightsAcesso Aberto-
Direitos: dc.rightsA concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade de Brasília e o IBICT a disponibilizar por meio dos sites www.bce.unb.br, www.ibict.br, http://hercules.vtls.com/cgi-bin/ndltd/chameleon?lng=pt&skin=ndltd sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, a partir desta data.-
Palavras-chave: dc.subjectMetagenômica-
Palavras-chave: dc.subjectAntibacteriano-
Palavras-chave: dc.subjectClonagem molecular-
Título: dc.titleDesenvolvimento de sistema baseado na produção de GFP dependente de densidade celular para a detecção e triagem funcional de genes com atividade antibacteriana-
Tipo de arquivo: dc.typelivro digital-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional – UNB

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