Efeito de polimorfismos no gene codificante para o domínio RNA-polimerase dependente de RNA da proteína NS5 na replicação e virulência do vírus da febre amarela

Registro completo de metadados
MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorBonaldo, Myrna Cristina-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/9601683263966731-
Autor(es): dc.contributorCabral, Luiz Mors-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/5525595141868422-
Autor(es): dc.contributorCabral, Luiz Mors-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/5525595141868422-
Autor(es): dc.contributorGómez, Mariela Martínez-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/6996439662947444-
Autor(es): dc.contributorRibeiro, Manuel Gustavo Leitão-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/8039485934181427-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/5503035881853084-
Autor(es): dc.creatorSilva, Amanda Ferreira Lacerda da-
Data de aceite: dc.date.accessioned2024-07-11T17:55:35Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2024-07-11T17:55:35Z-
Data de envio: dc.date.issued2023-07-28-
Data de envio: dc.date.issued2023-07-28-
Fonte completa do material: dc.identifierhttp://app.uff.br/riuff/handle/1/29516-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/760220-
Descrição: dc.descriptionO vírus da febre amarela (YFV) é um arbovírus que apresenta grande risco à saúde pública por ser o agente etiológico da doença febre amarela (FA). Apesar dos esforços para controle do vetor e campanhas de vacinação em massa, essa doença nunca foi erradicada e desde o início dos anos 2000 é responsável por surtos e mortes nos países endêmicos, principalmente na África e nas Américas. Nesse viés, de 2016 a 2019 o Brasil experimentou um dos maiores surtos de FA já descrito, do qual foi isolado o vírus identificado YFV RJ 155 que chamou atenção por apresentar fenótipo mais virulento e mais replicativo em ensaios de caracterização biológica, o que nos fez avaliar mais a fundo sua composição genética. Além dos nove polimorfismos de aminoácidos característicos dos vírus detectados durante o surto mais recente que ocorreu no Sudeste brasileiro, este apresentava outras seis modificações de aminoácidos específicas. Diante disso, visto que essas modificações podem representar moduladores de virulência, estudá-las é de extrema importância para elucidar melhor as bases moleculares de infecção e patogênese deste vírus. Sendo assim, utilizando genética reversa e metodologia do clone infeccioso, iniciamos o estudo por meio da análise de polimorfismos no gene da proteína NS5, mais especificamente três modificações de aminoácidos localizados no domínio RNA-polimerase dependente de RNA, já que é bem documentado que esta proteína tem papel crucial da replicação viral e virulência. Para isso, neste trabalho foi sintetizado um clone infeccioso viral baseado no YFV ES-504 (YF_IC), que é muito similar geneticamente ao YFV RJ 155, contendo as três mutações nesta proteína. Além disso, iniciamos a caracterização biológica desse vírus a fim de determinar se essas modificações isoladas interferiram no fenótipo viral, tornando-o mais virulento. Apesar de ainda serem necessários mais experimentos para concluir assertivamente, por meio da análise comparativa das placas de lise formadas pelo vírus sintetizado (YFV NS5 Triplo) pode-se dizer que as mudanças de aminoácidos localizadas no gene da proteína NS5 sozinhas não forma capazes de induzir mudanças significativas na virulência, já que a morfologia de suas placas se assemelha mais as placas formadas pelo YF_IC do que as placas de lise formadas pelo YFV RJ 155.-
Descrição: dc.descriptionConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico-
Descrição: dc.descriptionThe yellow fever virus (YFV) is an arbovirus that poses a significant risk to public health as the etiological agent of yellow fever (YF) disease. Despite efforts to control the vector and mass vaccination campaigns, this disease has never been eradicated and has been responsible for outbreaks and deaths in endemic countries, particularly in Africa and the Americas, since the early 2000s. In this context, from 2016 to 2019, Brazil experienced one of the largest YF outbreaks ever described, from which the isolated virus, identified as YFV RJ 155, drew attention due to its more virulent and replicative phenotype in biological characterization assays, prompting a deeper investigation of its genetic composition. In addition to the nine characteristic amino acid polymorphisms of the viruses belonging to the most recent outbreak in Southeast Brazil, this particular virus exhibited six other specific amino acid modifications. Given that these modifications may represent modulators of virulence, studying them is of utmost importance for better elucidating the molecular basis of YFV infection and pathogenesis. Therefore, using reverse genetics and the infectious clone methodology, we initiated the study by analyzing polymorphisms in the NS5 protein gene, specifically focusing on three amino acid modifications located in the RNA-dependent RNA polymerase domain, as it is well documented that this protein plays a crucial role in viral replication and virulence. To this end, an infectious viral clone based on YFV ES-504 (YF_IC) was synthesized, which is genetically very similar to YFV RJ 155, containing the three mutations in this protein. Furthermore, we began the biological characterization of this virus to determine if these isolated modifications interfered with the viral phenotype, making it more virulent. Although more experiments are still needed to draw definitive conclusions, the comparative analysis of the plaques formed by the synthesized virus (YFV NS5 Triple) suggests that the amino acid changes located in the NS5 protein gene alone are not capable of inducing significant changes in virulence, as the morphology of its plaques resembles those formed by YF_IC rather than the lytic plaques formed by YFV RJ 155.-
Descrição: dc.description52 p.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Direitos: dc.rightsOpen Access-
Direitos: dc.rightsCC-BY-SA-
Palavras-chave: dc.subjectVírus da febre amarela, virologia molecular, genética reversa, metodologia do clone infeccioso-
Palavras-chave: dc.subjectArbovírus, Vírus, Febre amarela, Genética molecular, Virologia-
Palavras-chave: dc.subjectYellow fever virus, molecular virology, reverse genetics, infectious clone methodology-
Título: dc.titleEfeito de polimorfismos no gene codificante para o domínio RNA-polimerase dependente de RNA da proteína NS5 na replicação e virulência do vírus da febre amarela-
Tipo de arquivo: dc.typeTrabalho de conclusão de curso-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense - RiUFF

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