Impacto da temperatura de síntese na biocompatibilidade e bioabsorção de hidroxiapatitas carbonatadas nanoestruturadas

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorGranjeiro, José Mauro-
Autor(es): dc.contributorZambuzzi, Willian Fernando-
Autor(es): dc.contributorLourenço, Simone de Queiroz Chaves-
Autor(es): dc.contributorMaia, Mônica Diuana Calasans-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/7932927631777653-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/8928414093493138-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/9052519251465705-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/9087428606376572-
Autor(es): dc.contributorhttp://lattes.cnpq.br/3420027465870765-
Autor(es): dc.creatorSartoretto, Suelen Cristina-
Data de aceite: dc.date.accessioned2024-07-11T17:49:40Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2024-07-11T17:49:40Z-
Data de envio: dc.date.issued2019-02-12-
Data de envio: dc.date.issued2019-02-12-
Data de envio: dc.date.issued2014-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://app.uff.br/riuff/handle/1/8535-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/758323-
Descrição: dc.descriptionA hidroxiapatita (HA) é um dos materiais mais utilizados internacionalmente em aplicações médicas envolvendo a substituição/regeneração óssea e dentária e, mais recentemente, em terapias celulares, devido às suas propriedades de biocompatibilidade e bioatividade. Contudo, sua utilização pelo Sistema Único de Saúde foi descontinuada em função de sua baixa bioabsorção. A hidroxiapatita carbonatada (cHA) foi desenvolvida com o objetivo de melhorar as propriedades de dissolução da HA em fluidos corporais e ampliar sua capacidade terapêutica pela modificação de sua composição química. O objetivo deste trabalho foi avaliar a biocompatibilidade e bioabsorção das cHAs sintetizadas a 5°C, 37°C e 90°C, não sinterizadas, comparadas à HA estequiométrica sintetizada a 90°C e sinterizada. Os materiais foram caracterizados utilizando a Difração de Raio X (DRX), a Espectroscopia Vibracional no Infra Vermelho por Transformada de Fourier (EVIVTF) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). A citotoxicidade dos diferentes biomateriais foi mensurada através da atividade mitocondrial (redução do XTT) e integridade da membrana celular (incorporação de Vermelho Neutro) utilizando préosteoblastos murinos MC3T3-E1 tratados com meio condicionado pelos diferentes biomateriais. Camundongos Balb/C (n=75) foram distribuídos aleatoriamente em 5 grupos experimentais. Após a anestesia, tricotomia e antissepsia, realizou-se uma incisão de 10 mm no dorso dos camundongos para implantação subcutânea de esferas dos biomateriais processados nas temperaturas de 5ºC (Grupo 1), 37ºC (Grupo 2), 90°C (Grupo 3), HA 90°C/sinterizada (Grupo 4) e nenhuma implantação (Grupo 5, sham) seguido de sutura. Nos períodos experimentais de 1, 3 e 9 semanas, os animais foram submetidos a eutanásia, as amostras foram coletadas e processadas para inclusão em parafina e coradas com hematoxilina e eosina para avaliação descritiva e semiquantitativa do efeito biológico dos biomateriais no tecido subcutâneo segundo a norma ISO 10993-6:2007. Mastócitos foram identificados por coloração com azul de toluidina e quantificados. Os difratogramas das cHAs evidenciaram picos correspondentes ao de uma HA padrão, mas notou-se alargamento da base dos picos, sugerindo aumento do grau de dissolução dos biomateriais. As análises em EVIVTF confirmaram a presença de carbonato e água nas cHAs testadas. As micrografias eletrônicas de varredura exibiram diferentes morfologias das cHAs possivelmente relacionadas ao método de gotejamento durante a síntese além de diferenças na superfície quando comparadas com a HA estequiométrica. Todos os materiais avaliados foram atóxicos nos ensaios in vitro. In vivo, a macroscopia do tecido reacional dos grupos das cHAs apresentaram sinais de maior bioabsorção; a análise histológica do efeito biológico local após implantação demonstra que as cHAs e HA foram, respectivamente, levemente e moderadamente irritantes. A densidade de mastócitos para a HA 90°C aumentou significativamente em relação ao grupo sham e no grupo cHA 37°C, houve diminuição tempo dependente da densidade de mastócitos (p<0,05). Foi possível concluir que as cHAs estudadas mostraram-se biocompatívies e bioabsorvíveis, principalmente as sintetizadas em 5°C e 37°C, apontando esses materiais como potenciais substitutos à HA estequiométrica em aplicações biomédicas regenerativas-
Descrição: dc.descriptionHydroxyapatite (HA) is one of the most common materials used internationally in medical applications involving bone and dental substitution/regeneration and, more recently, in cellular therapies, due to its biocompatibility and bioactivity properties. However, due to the low bioabsorption of HA, its use by the Unified Health System of Brazil was discontinued. Carbonated HA (cHA) was developed with the objective of improving the dissolution properties of HA in body fluids and broadening the therapeutic capacity of HA by modifying its chemical composition. The objective of this study was to evaluate the biocompatibility and bioabsorption of unsintered cHA microspheres (cHAs) synthesized at 5°C, 37°C and 90°C compared to sintered stoichiometric HA synthesized at 90°C. The materials were characterized using x-ray diffraction (XRD), Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy and scanning electron microscopy (SEM) methods. The cytotoxicity of the different biomaterials (BMs) was measured via the mitochondrial activity [the reduction of 2, 3-bis (2- methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino) carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide (XTT)] and cellular membrane integrity (the incorporation of neutral red) of MC3T3- E1 murine pre-osteoblasts treated with media conditioned with the different BMs. Balb/C mice (n=75) were randomly distributed into 5 experimental groups. After anesthesia, trichotomy and antisepsis, a 10-mm incision was made in the dorsum of the mice to subcutaneously implant the BM microspheres processed at 5°C (Group 1), 37°C (Group 2) and 90°C (Group 3), the sintered HA processed at 90°C (Group 4, control) or no implantation (Group 5, sham); the incision was then sutured. After 1, 3 and 9 weeks, the animals were euthanized. Samples were collected and processed for inclusion in paraffin and stained with hematoxylin and eosin for evaluation of the biological effect of the BMs on the subcutaneous tissue according to the ISO 10993-6:2007 standard. Mast cells were identified by staining with toluidine blue and quantified. Diffractograms of the cHAs displayed peaks corresponding to an HA standard, but a broadening of the base of the peaks was noted, suggesting an increase in the degree of dissolution of the BMs. The FTIR analyses confirmed the presence of carbonate and water in the tested cHAs. The scanning electron micrographs revealed different morphologies of the cHAs, possibly related to the dripping synthesis method in addition to surface differences compared to stoichiometric HA. All of the evaluated materials were non-toxic in the in vitro tests. In vivo, the macroscopic tissue reactions of the groups implanted with cHAs revealed signs of increased bioabsorption; the histological analysis of the local biological effects after implantation demonstrates that the cHAs and HA were slightly and moderately irritating, respectively. The density of mast cells for the HA 90°C group increased significantly in relation to the sham group, and in the cHA 37°C group, there was a decrease in time depending on the density of mast cells (p<0.05). It is possible to conclude that the studied cHAs are biocompatible and bioabsorbable, primarily those synthesized at 5°C and 37°C, indicating that these materials are potential substitutes for stoichiometric HA in regenerative biomedical applications-
Descrição: dc.description70 f.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Direitos: dc.rightsopenAccess-
Direitos: dc.rightsopenAccess-
Direitos: dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/-
Direitos: dc.rightsCC-BY-SA-
Palavras-chave: dc.subjectBioabsorção-
Palavras-chave: dc.subjectBiomaterial-
Palavras-chave: dc.subjectBiocompatibilidade-
Palavras-chave: dc.subjectCitotoxicidade-
Palavras-chave: dc.subjectHidroxiapatita-
Palavras-chave: dc.subjectTeste de material-
Palavras-chave: dc.subjectSubstituto ósseo-
Palavras-chave: dc.subjectBioabsorption-
Palavras-chave: dc.subjectBiomaterial-
Palavras-chave: dc.subjectBiocompatibility-
Palavras-chave: dc.subjectCytotoxicity-
Título: dc.titleImpacto da temperatura de síntese na biocompatibilidade e bioabsorção de hidroxiapatitas carbonatadas nanoestruturadas-
Título: dc.titleImpact of synthesis temperature on biosorption and biocompatibility of nanostructured carbonated hydroyapatites-
Tipo de arquivo: dc.typeDissertação-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense - RiUFF

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