Análise da citotoxicidade de extrato bruto e partições químicas da planta Equisetum Hyemale em linhagens de carcinoma de células escamosas de boca

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorRobbs, Bruno Kaufmann-
Autor(es): dc.contributorRobbs, Bruno Kaufmann-
Autor(es): dc.contributorMilton, Flora Aparecida-
Autor(es): dc.contributorPascoal, Vinicius D’Avila Bitencourt-
Autor(es): dc.creatorQueiroz, Lucas Nicolau de-
Data de aceite: dc.date.accessioned2024-07-11T17:34:38Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2024-07-11T17:34:38Z-
Data de envio: dc.date.issued2019-08-12-
Data de envio: dc.date.issued2019-08-12-
Data de envio: dc.date.issued2018-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://app.uff.br/riuff/handle/1/10827-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/753112-
Descrição: dc.descriptionO carcinoma de células escamosas de boca (CCEB) se destaca como um problema de saúde pública no Brasil, isso devido sua alta incidência e baixa taxa de sobrevida, mesmo com os avanços de diagnósticos e tratamentos, tornando o desenvolvimento de novos tratamentos necessário. Plantas do gênero Equisetum são popularmente utilizadas no tratamento de diversas doenças entre elas o câncer. Já foi demonstrado o efeito citotóxico de plantas do gênero em células tumorais, mas pouco se sabe do efeito da espécie Equisetum hyemale no tratamento de CCEB. Com esse objetivo, foi coletado a espécie na região de Nova Friburgo, RJ, foi preparado extrato bruto etanólico a partir do seucaule, foram realizados ensaios clonogênicos e ensaios de viabilidade celular por MTT. Posteriormente, o extrato bruto do caule foi particionado em frações liquido/liquido em hexâno, diclorometano e acetato de etila. Foram feitos ensaios de viabilidade celular com concentrações entre 250 µg/mL e 15,6 µg/mL de cada partição. O IC50 foi calculado através de curva de regressão não linear no programa GraphPad Prism 5. A morfologia das células foi analisada por microscopia e a morte celular confirmada por marcado de Iodeto de propídio (I.P). Testes de hemólise foram realizados com sangue de cabra com a partição de acetato de etila. Foram realizados no mínimo 3 experimentos independentes e com as células OSCC9 (Carcinoma de células escamosas orais). Através dos ensaios clonogênicos e ensaios de MTT com os extratos brutos foram calculados o IC50 de 200,6 ± 0,09 µg/mL. Devido aos resultados promissores com o extrato etanólico, foram realizados os ensaios de viabilidade celular com as partições e foi calculado o IC50 para cada uma delas, sendo a partição de acetato de atila IC50 = 64,5 ± 0,072 µg/mL, hexâno e a de diclorometano não alcançou 50% de inibição nas concentrações testadas. Como controle positivo foi utilizado quimioterápico Carboplatina com IC50 de 366,1 ± 0,18 µg/mL. Através de microscopia foi analisada a morfologia das células tratadas com a partição de acetato de etila. As células se apresentavam em menor número, com citoplasma aumentado e com grande quantidade de grânulos e vacúolos. Através da contagem do número absoluto de células e analises de permeabilidade por I.P. verificamos que de fato as células estavam morrendo. O ensaio de hemólise da partição de acetato demonstrou hemólise semelhante aos controles, inferiores de 5%. Após análises dos resultados pode se concluir que o extrato do caule Equisetum hyemale possui um efeito de inibição significativa da viabilidade das células escamosas orais, sendo a fração de acetato a mais eficaz.-
Descrição: dc.descriptionThe oral squamous cell carcinoma (CCEB) stands out as a public health problem in Brazil, due to its high incidence and low survival rate, even with advances in diagnosis and treatment. Therefore the development of new treatments is necessary. Plants of the genus Equisetum are popularly used in the treatment of various diseases including cancer. The cytotoxic effect of plants of the genus on tumor cells has been demonstrated, but not much is known about the effect of the Equisetum hyemale species on the treatment of CCEB. In order to test the efficacy of E. hyemale in CCEB, the species was collected in the region of Nova Friburgo, RJ, raw ethanolic extract was prepared from its stem, clonogenic assays and cell viability assays were performed by MTT. Subsequently, the raw stem extract was partitioned into liquid / liquid fractions in hexane, dichloromethane and Ethyl Acetate. Cell viability assays were performed with concentrations between 250 μg / mL and 15.6 μg / mL of each partition. The IC 50 was calculated by a non-linear regression curve in the GraphPad Prism 5 program. Cell morphology was analyzed by microscopy and cell death confirmed by propidium iodide (P.I.) labeling. Hemolysis tests were performed with goat blood with the Ethyl Acetate partition. At least 3 independent experiments with OSCC9 cells (oral squamous cell carcinoma) were performed. Clonogenic assays and MTT assays with crude extracts were calculated as the IC50 of 200.6 ± 0.09 μg / mL. Due to the results with the ethanolic extract, the cell viability assays were performed with the partitions and the IC50 was calculated for each of them, with the Ethyl Acetate IC 50 = 64.5 ± 0.072 μg /mL, Hexane and the dichloromethane did not reach 50% inhibition at the concentrations tested. As a positive control, Carboplatin chemotherapy with IC50 of 366.1 ± 0.18 μg /mL was used. The morphology of cells treated with ethyl acetate and hexane partitions was analyzed by microscopy. The cells presented in smaller numbers, with increased cytoplasm and with great amount of granules and vacuoles. By counting the absolute number of cells and permeability analyzes by P.I. we found that indeed the cells were dying. The hemolysis assay of the acetate partition showed hemolysis similar to controls, less than 5%. After analysis of the results it can be concluded that Equisetum hyemale stem extract has a significant inhibition effect on the viability of oral squamous cells, with the acetate fraction being the most effective.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Publicador: dc.publisherUniversidade Federal Fluminense-
Publicador: dc.publisherNova Friburgo-
Direitos: dc.rightsopenAccess-
Direitos: dc.rightsopenAccess-
Direitos: dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/-
Direitos: dc.rightsCC-BY-SA-
Palavras-chave: dc.subjectCarcinoma de Célula Escamosa-
Palavras-chave: dc.subjectCarcinogênese-
Palavras-chave: dc.subjectEtnobotânica-
Palavras-chave: dc.subjectTratamento-
Palavras-chave: dc.subjectEquisetum-
Palavras-chave: dc.subjectNeoplasia bucal-
Palavras-chave: dc.subjectSquamous Cell Carcinoma-
Palavras-chave: dc.subjectCarcinogenesis-
Palavras-chave: dc.subjectEthnobotany-
Palavras-chave: dc.subjectTreatment-
Palavras-chave: dc.subjectEquisetum-
Título: dc.titleAnálise da citotoxicidade de extrato bruto e partições químicas da planta Equisetum Hyemale em linhagens de carcinoma de células escamosas de boca-
Tipo de arquivo: dc.typeTrabalho de conclusão de curso-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense - RiUFF

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