Participação de componentes do metabolismo do fosfatidilinositol no controle de vias de sinalização induzidas por glicose em Saccharomyces cerevisiae.

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorBrandão, Rogélio Lopes-
Autor(es): dc.creatorCarvalho, Fernanda Machado de-
Data de aceite: dc.date.accessioned2019-11-06T13:29:06Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2019-11-06T13:29:06Z-
Data de envio: dc.date.issued2013-08-05-
Data de envio: dc.date.issued2013-08-05-
Data de envio: dc.date.issued2007-
Fonte completa do material: dc.identifierhttp://hdl.handle.net/123456789/3111-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/556277-
Descrição: dc.descriptionTrabalhos realizados pelo nosso grupo de pesquisa demonstraram que a ativação, induzida por glicose, da H + -ATPase de membrana citoplasmática em S. cerevisiae é dependente do cálcio extracelular e da ação da proteína Pkc1p, além disso, o metabolismo do fosfatidilinositol parece estar envolvido nesse processo: uma cepa de levedura (PJ69-2a) contendo a deleção do gene ARG82, que codifica uma quinase IP3-IP4 específica, possui altos níveis de IP3, que controlam os níveis de cálcio citosólico livre. Este estudo, também, mostrou que esse mutante não crescia na presença de galactose. Decidimos, então, analisar o crescimento celular em diferentes fontes de carbono de cepas que apresentavam deleção de genes que codificam proteínas envolvidas no metabolismo do fosfatidilinositol. Somente o mutante arg82D não apresentou crescimento em fontes alternativas de carbono. Verificamos, ainda que o mesmo não apresenta a segunda fase de crescimento celular, possui problemas na desrepressão de genes controlados por glicose e confirmamos novamente a participação de Arg82p na ativação da H + -ATPase. Esses resultados são semelhantes àqueles já demonstrados por outros trabalhos de nosso grupo de pesquisa para o mutante pkc1Δ. Recentemente, adquirimos a coleção de cepas mutantes EUROSCARF, apresentando deleções individuais em vários genes; decidimos então averiguar se o mutante arg82D dessa coleção apresentaria os mesmos resultados do mutante com o qual vínhamos trabalhando. De forma intrigante, eles foram diferentes. Diante desse fato, uma vez que se tratava realmente dos mutantes arg82D, o que foi confirmado por reações de PCR, deletamos novamente o gene ARG82na cepa selvagem PJ69-2a. Além disso, construímos cepas de leveduras que apresentavam a deleção do gene ARG82em associação com deleções de genes que codificam proteínas envolvidas no metabolismo de IP3e cálcio e analisamos seus fenótipos. Nossos resultados sugerem que um fator específico do “background” PJ69-2a – uma possível superexpressão ou mutação do gene YVC1, codificante para um canal de cálcio vacuolar - em associação com um papel direto ou indireto de Arg82p são responsáveis pelo envolvimento do metabolismo do fosfatidilinositol na desrepressão de genes controlados por glicose, metabolismo de fontes de carbono e ativação, induzida por glicose, da H + -ATPase. __________________________________________________________________________________________-
Descrição: dc.descriptionABSTRACT: Previous works from our research group demonstrated that the glucose-induced activation of plasma membrane H + -ATPase in S. cerevisiae is dependent of the extracellular calcium and Pkc1 p action; furthermore, the phosphatidylinositol metabolism seems to be involved in this process: a yeast strain (PJ69-2a) presenting a deletion of geneARG82, which encodes a dual-specificity IP3-IP4protein kinase, shows high levels of IP3, which controls the free cytosolic calcium levels. This study also showed that this mutant does not grow in presence of galactose. In this context, we decided to analyze the cellular growth on different carbon sources of strains presenting deletion of genes that encodes proteins involved in the phosphatidylinositol metabolism. Only the arg82D mutant did not grow on media containing alternative carbon sources. Subsequently, we verified that this mutant does not present a second phase of cellular growth; it shows problems in the derepression process of genes controlled by glucose and we confirmed again the involvement of Arg82 p in activation of H + -ATPase. These results are similar to pkc1Δ mutant phenotypes, which were demonstrated by others works from our research group. Recently, we acquired the EUROSCARF collection of yeast deleted strains and we decided to check if the EUROSCARF arg82D mutant would present the same response of the mutant which has been used in our experiments. Intriguingly, they were different. In order to explain this, since both strains are real mutants that were confirmed by PCR, we deleted, again, the gene ARG82in the wild type PJ69-2a. Moreover, we constructed yeast strains presenting the deletion of gene ARG82in combination with deletions of genes that encode proteins involved in IP3and calcium metabolism and we analyzed their phenotypes. Our results suggest that, a specific factor of the background PJ69-2a – a possible overexpression or mutation of gene YVC1, that encondes a vacuolar calcium channel - in connection with a direct or indirect action of Arg82p are responsible by the involvement of phosphatidylinositol metabolism in the derepression process of genes controlled by glucose, carbon source metabolism and glucose-induced activation of H + -ATPase-
Idioma: dc.languagept_BR-
Publicador: dc.publisherPrograma de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto.-
Palavras-chave: dc.subjectFosfatidilinositol-
Palavras-chave: dc.subjectSaccharomyces cerevisae-
Palavras-chave: dc.subjectGlicose-
Título: dc.titleParticipação de componentes do metabolismo do fosfatidilinositol no controle de vias de sinalização induzidas por glicose em Saccharomyces cerevisiae.-
Tipo de arquivo: dc.typelivro digital-
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