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Desenvolvimento de um protótipo de kit para diagnóstico da leishmaniose visceral canina empregando a citometria de fluxo
Use este link compartilhar ou citar este material: http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/555304
Registro completo de metadados
| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Reis, Alexandre Barbosa | - |
| Autor(es): dc.creator | Ker, Henrique Gama | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2019-11-06T13:26:09Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2019-11-06T13:26:09Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2013-02-14 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2013-02-14 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2012 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | http://hdl.handle.net/123456789/2147 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/555304 | - |
| Descrição: dc.description | A leishmaniose visceral encontra-se em expansão em alguns centros urbanos sendo importante destacar o papel dos cães como reservatório da doença. Assim, o controle da leishmaniose visceral canina (LVC) torna-se relevante, sendo as ações preconizadas pelo ministério da saúde baseadas num tripé de ações que sugerem o tratamento dos casos humanos, combate ao vetor e a eutanásia dos cães soropositivos. No entanto, devido à limitação na eficiência dos testes de diagnósticos atualmente empregados (RIFI e ELISA), a eliminação destes cães torna-se cada vez mais difícil e questionável. Neste contexto, o presente projeto propôs desenvolver e validar um protótipo de kit de diagnóstico pela pesquisa de anticorpos anti-Leishmania fixada através da técnica de citometria de fluxo. Para cumprir com o objetivo, foram utilizados soros de cães naturalmente infectados, portadores de diferentes formas clínicas, provenientes da área endêmica de Belo Horizonte, e soros de cães não infectados do Centro de Ciência Animal (CCA) da UFOP. Na primeira etapa deste projeto, houve a produção de promastigotas de L. infantum que, em seguida, foram preservadas em diferentes conservantes (Fenol 0.35%, Formol 0.5%, Thimerosal 0.01% e controle PBS) e em diferentes condições de temperatura (25°C, 4°C e -20°C). Na etapa seguinte, a etapa de validação dos antígenos, foram realizadas avaliações mensais das condições de rendimento reacional, aspectos morfológicos e microbiológicos das diferentes preparações antigênicas. Estas análises revelaram que a condição ideal de preservação dos antígenos de L. infantum a serem empregados no protótipo de kit é a fixação por formol 0,5% e acondicionamento em geladeira. A última etapa deste estudo avaliou os índices de desempenho do protótipo empregando o suporte antigênico conservado em formol 0,5% e estocado em geladeira. Os resultados observados revelaram um excelente potencial do protótipo no diagnóstico da LVC, com valores de sensibilidade igual a 95%, especificidade de 100%, valor preditivo positivo de 100%, valor preditivo negativo igual a 83,3% e a acurácia do teste foi estimada em 96%. Desta forma, a partir deste trabalho, torna-se disponível uma nova alternativa para o diagnóstico sorológico da LVC, que poderá ser empregada em campanhas de controle da doença no Brasil. ____________________________________________________________________________________________________ | - |
| Descrição: dc.description | ABSTRACT: Visceral leishmaniasis is expanding in some urban centers and it is important to highlight the role of dogs as reservoirs of the disease. Therefore, the control of Canine Visceral Leishmaniasis (CVL) is important, and the Brazilian Ministry of Health established three pivotal actions that include the treatment of the human cases of the disease, vector control and the euthanasia of seropositive dogs. However, due to the limited efficiency of the diagnosis tests commonly used in serological trails (RIFI and ELISA), the elimination of these dogs becoming increasingly difficult and questionable. So, this project proposed the development and validation of a new diagnosis prototype kit employing the flow cytometry anti-fixed Leishmania infantum promastigotes as a novel serological device for laboratorial diagnosis of CVL. To achieve this goal, sera of naturally infected dogs that have different clinical forms from the endemic area of Belo Horizonte were used. In addition to these, sera of non-infected dogs maintained in the UFOP Animal Facilities were included as a control group. In the first step of this study, promastigotes of L. infantum were produced and kept in different preservative solutions (Phenol 0,35%, Formaldehyde 0,5%, Thimerosal 0,01% and PBS) and stored at different temperatures (25°C, 4°C e -20°C). Then, in the next stage to validate these antigens, evaluations of reaction yield, so as the morfologic and microbiologic features, were conduced monthly. These assessment showed that the best condition to preserve the antigenic support of the prototype was obtained when the promastigotes forms are put in Formaldehyde 0,5% at the refrigerator temperature (4°C). Lastly, the performance of the prototype was evaluated when those antigens were used. The results demonstrated an excellent potencial os this new method in the diagnosis of CVL. It is possible to observe great values of sensibility (95%), specificity (100%), positive and negative predictive values (100% and 83,3% respectively) so as de accuracy (96%). In conclusion, from this work, one alternative methodology is available for the CVL immunodiagnosis. The prototype may contribute. | - |
| Idioma: dc.language | pt_BR | - |
| Publicador: dc.publisher | Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Imunologia aplicada | - |
| Título: dc.title | Desenvolvimento de um protótipo de kit para diagnóstico da leishmaniose visceral canina empregando a citometria de fluxo | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - UFOP | |
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