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| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Resende, Jaime Vilela de | - |
| Autor(es): dc.contributor | Veríssimo, Lizzy Ayra Alcântara | - |
| Autor(es): dc.contributor | Veríssimo, Lizzy Ayra Alcântara | - |
| Autor(es): dc.contributor | Fontan, Rafael da Costa Ilhéu | - |
| Autor(es): dc.creator | Meira, Ana Cristina Freitas de Oliveira | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2026-02-09T12:20:46Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2026-02-09T12:20:46Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2020-06-09 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2020-06-09 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2020-06-08 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2020-02-05 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://repositorio.ufla.br/handle/1/41391 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/1159428 | - |
| Descrição: dc.description | Supermacroporous polyacrylamide cryogels are polymeric materials that have stood out among the new adsorbents developed for use in chromatographic processes. Its application has extended to the purification of several biomolecules such as lysozyme. Due to its effective antimicrobial action against some bacteria, this enzyme is of great industrial interest. This work aimed to synthesize polyacrylamide cryogels, functionalize them with the amino acid L-phenylalanine and apply them to lysozyme adsorption by hydrophobic affinity chromatography under different conditions of ionic strength, pH and type of salt. The best experimental condition for lysozyme adsorption was used to capture this enzyme, in continuous mode, from a solution containing chicken egg white. Subsequently, the cryogel functionalized with L-phenylalanine (cryogel-Phe) was chemically characterized by Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), its mechanical and morphological properties (macro, micro and mesoporous fraction, bound water fraction and dry polymer, swelling capacity and degree of expansion), crystallinity, thermal properties (differential scanning calorimetry, DSC and thermogravimetry, TGA) and hydrodynamic properties of the column were also analyzed. The best experimental condition for lysozyme adsorption was obtained by using sodium thiocyanate saline solution 0.025 mol L-1 at pH 5.0. In this condition, the adsorptive capacity (q) of the cryogel-Phe was 67.65 ± 1.52 mg g- 1 . FTIR confirmed the presence of the amino acid L-phenylalanine immobilized in the cryogen-Phe, since peaks at 1716 cm-1 , 1475 cm-1 , 1510 cm-1 and 1355 cm- 1 indicated the presence of this amino acid and a reduction in the peak at 1100 cm- 1 was observed indicating that part of the epoxy groups available for immobilization of ligands on the cryogel surface were filled. In addition, Kjeldahl's analysis of L-phenylalanine solutions before and after contact with the cryogel indicated an immobilization of 458.65 ± 40.59 mgphenylalanine gcriogel -1 . The cryogel-Phe showed a Young's modulus of 526.71 ± 27.21 kPa. Morphological analyzes indicated high porosity (0.95) of the material with pores between 10 μm and 75 μm. By XRD the cryogel-Phe showed characteristics of an amorphous material. DSC indicated a glass transition temperature of 17.80 ° C and the TGA indicated that the onset of thermal degradation occurred after 200 ° C. The column exhibited a hydraulic permeability of 4.15 x 10-13 m2, an axial dispersion coefficient ranging from 10-7 to 10-6 m2 s -1 and height equivalent to a theoretical plate (HETP) between 0.10 and 0.21 cm. It was concluded that the cryogel-Phe is an effective material in the capture of lysozyme by hydrophobic affinity chromatography, because a purification factor of 11.49, a recovery of 31.66% of lysozyme with a purity of 87.92% and enzymatic activity of 1294.17 U mL-1 was obtained. In addition, this support showed high mechanical and thermal resistance, high porosity, low axial dispersion and high hydraulic permeability, being an attractive adsorbent to be used in the purification of this biomolecule. | - |
| Descrição: dc.description | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) | - |
| Descrição: dc.description | Criogéis de poliacrilamida supermacroporosos são materiais poliméricos que tem se destacado entre os novos adsorventes desenvolvidos para o emprego em processos cromatográficos. Sua aplicação tem se estendido na purificação de diversas biomoléculas como a lisozima. Devido à sua ação antimicrobiana eficaz contra algumas bactérias, esta enzima é de grande interesse industrial. Este trabalho objetivou sintetizar criogéis de poliacrilamida, funcionaliza-los com o aminoácido L-fenilalanina e aplica-los na adsorção de lisozima por cromatografia de afinidade hidrofóbica em diferentes condições de força iônica, pH e tipo de sal. A melhor condição experimental de adsorção da lisozima foi empregada para a captura dessa enzima, em modo contínuo, a partir de solução contendo clara de ovo de galinha. Posteriormente, o criogel funcionalizado com L-fenilalanina (criogel-Phe) foi caracterizado quimicamente por espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), suas propriedades mecânicas, morfológicas (fração de macro, micro e mesoporos, fração de água ligada e polímero seco, capacidade de inchamento e grau de expansão), cristalinidade, propriedades térmicas (calorimetria exploratória diferencial, DSC e termogravimetria, TGA) e propriedade hidrodinâmica da coluna também foram analisadas. A melhor condição experimental para a adsorção da lisozima foi obtida ao se utilizar a solução salina de tiocianato de sódio 0,025 mol L-1 em pH 5,0. Nessa condição, a capacidade adsortiva (q) do criogel-Phe foi de 67,65 ± 1,52 mg g-1 . O FTIR confirmou a presença do aminoácido L-fenilalanina imobilizado no criogel-Phe, pois picos em 1716 cm-1 , 1475 cm-1 , 1510 cm-1 e 1355 cm-1 indicaram a presença deste aminoácido e foi observado uma redução no pico 1100 cm-1 indicando que parte dos grupos epóxi disponíveis para imobilização de ligantes na superfície do criogel foram preenchidos. Além disso, a análise de Kjeldahl das soluções de L-fenilalanina antes e após contato com o criogel indicaram que houve uma imobilização de 458,65 ± 40,59 mgfenilalanina gcriogel -1 . O criogel-Phe apresentou um módulo de Young de 526,71 ± 27,21 kPa. As análises morfológicas indicaram alta porosidade (0,95) do material com poros entre 10 μm e 75 μm. Pelo DRX o criogel-Phe apresentou características de um material amorfo. O DSC indicou uma temperatura de transição vítrea de 17,80 °C e a TGA indicou que o início da degradação térmica ocorreu após 200 °C. A coluna exibiu uma permeabilidade hidráulica de 4,15 x 10-13 m2, um coeficiente de dispersão axial variando de 10-7 a 10-6 m2 s -1 e altura equivalente a um prato teórico (HETP) entre 0,10 e 0,21 cm. Concluiu-se que o criogel-Phe é um material eficaz na captura de lisozima por cromatografia de afinidade hidrofóbica, pois foi obtido um fator de purificação de 11,49, uma recuperação de 31,66% de lisozima com pureza de 87,92% e atividade enzimática de 1294,17 U mL-1 . Além disso, este suporte apresentou alta resistência mecânica e térmicas, elevada porosidade, baixa dispersão axial e alta permeabilidade hidráulica, sendo um adsorvente atraente para ser empregado na purificação desta biomolécula. | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Idioma: dc.language | pt_BR | - |
| Publicador: dc.publisher | Universidade Federal de Lavras | - |
| Publicador: dc.publisher | Programa de Pós-graduação em Ciência dos Alimentos | - |
| Publicador: dc.publisher | UFLA | - |
| Publicador: dc.publisher | brasil | - |
| Publicador: dc.publisher | Departamento de Ciência dos Alimentos | - |
| Direitos: dc.rights | restrictAccess | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Lisozima | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Purificação | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Criogel | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Lysozyme | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Purification | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Cryogel | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Ciência dos Alimentos | - |
| Título: dc.title | Aplicação de criogéis funcionalizados com L-fenilalanina na adsorção de lisozima por cromatografia de afinidade hidrofóbica | - |
| Título: dc.title | Application of cryogels functioned with L-phenylalanine in the lysozyme adsorption by hydrophobic affinity chromatography | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | dissertação | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional da Universidade Federal de Lavras (RIUFLA) | |
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