Indução de embriões somáticos em diferentes clones de Coffea canephora

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorPaiva, Luciano Vilela-
Autor(es): dc.contributorPinto, Renan Terassi-
Autor(es): dc.contributorCasarin, Tatiane-
Autor(es): dc.contributorPaiva, Luciano Vilela-
Autor(es): dc.contributorSantos, Breno Régis-
Autor(es): dc.contributorPaiva, Renato-
Autor(es): dc.contributorStein, Vanessa Cristina-
Autor(es): dc.creatorSilva, Paloma Carmelina da-
Data de aceite: dc.date.accessioned2026-02-09T11:12:47Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2026-02-09T11:12:47Z-
Data de envio: dc.date.issued2023-01-04-
Data de envio: dc.date.issued2023-01-04-
Data de envio: dc.date.issued2023-01-04-
Data de envio: dc.date.issued2022-10-20-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://repositorio.ufla.br/handle/1/55730-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/1136064-
Descrição: dc.descriptionWith the advent of CRISPR technology, the search for new efficient techniques for tissue culture in coffee intensified, mainly aiming at the improvement of parameters related to the techniques currently used, such as the low efficiency of editing events and the long period of time to obtaining genetically modified plants. Considering that Brazil is the leader in coffee production, with C. Canephora being the second most cultivated species, this work aimed to determine efficient protocols for obtaining somatic embryos of C. canephora, using direct somatic embryogenesis (ESD) and embryogenic cell suspension protoplast (ECS), aiming applications in future work with gene editing via CRISPR/Cas9 technology. For this, different ESD induction experiments were carried out in C. canephora, and tests were also carried out to select the influence of different ESD protocols (for clones 2 and 14 they evaluated the influence of different regions of the leaves) inoculated in medium for ESD clone 2), and several different clones (for clone 2, 14) in the process (for clones 22, 11). Concomitantly, was sought in this work, the induction of somatic embryos from embryogenic cell suspension protoplasts of C. canephora (Clone 14), for this, Yasuda culture medium was used, enriched with of charcoal, varying antioxidant agents, carbohydrates and abscisic acid (ABA) concentrations. The experiments were carried out in a completely randomized design and for the analysis of the ESD experiments, the Tukey test was used at 95% confidence, and for the experiments of induction of embryos in embryogenic cell suspension of protoplasts, regression analysis was used linear. In the ESD experiment, means of regeneration frequency and mean number of embryos per explant were evaluated. For the embryo induction experiment in protoplast callus, the average number of embryos obtained in each treatment was evaluated. The results achieved in this study showed that clone 2 was more responsive in somatic embryogenesis when compared to clones 14 and 22, both in higher explant regeneration frequencies and in number of embryos per regenerated explant, thus indicating that ESD is a highly genotype-dependent technique. For the experiment on the influence of different regions of the leaf on the embryogenic response, no differences were found between the means obtained, as well as for different protocols used. Concerning the induction of formation of ECS somatic embryos, the production of embryos was observed only in the culture medium enriched with 30 gL-1 sucrose and added of ABA, with no significant difference between different concentrations of the growth regulator in the formation of embryos. In this way, it is concluded with this work that it is possible to use ESD as a way of regenerating genetically edited embryos, as well as the application of protoplasts in the coffee edition, although further studies are still needed in relation to the increase in the frequency of regeneration and its further maturation.-
Descrição: dc.descriptionCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)-
Descrição: dc.descriptionCom o advento da tecnologia CRISPR, a busca por novas técnicas eficientes de cultura de tecidos no cafeeiro tem se intensificado cada vez mais, visando principalmente o aperfeiçoamento de parâmetros relacionados às técnicas utilizadas atualmente, como a baixa eficiência dos eventos de edição e extenso período de tempo para a obtenção de plantas geneticamente editadas. Considerando que o Brasil ocupa a liderança na produção de café, sendo C. Canephora a segunda espécie mais cultivada, este trabalho teve como objetivo a determinação de protocolos eficientes de obtenção de embriões somáticos de C. canephora, utilizando embriogênese somática direta (ESD) e suspensão celular embriogênica de protoplastos, almejando aplicações em futuros trabalhos com edições genéticas via tecnologia CRISPR/Cas9. Para tal, foram realizados diferentes experimentos de indução ESD em C. canephora, inicialmente foram realizados testes para a verificação da influência de diferentes protocolos de ESD (para os clones 2 e 14), sendo também avaliado a influência das diferentes regiões das folhas ao serem inoculadas em meio para ESD (para clone 2), e posteriormente verificou-se a influência de diferentes clones no processo da ESD (para os clones 2, 14 e 22). Concomitantemente, buscou-se neste trabalho a indução de embriões somáticos de suspensão celular embriogênica de protoplastos (ECS) de C. canephora (Clone 14), para isso, utilizou-se meio de cultura Yasuda, enriquecido com carvão e variando agentes antioxidantes, carboidratos e concentrações de ácido abscísico (ABA). Os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado e para as análises dos experimentos de ESD utilizou-se o teste de Tukey a 95% de confiança, já para os experimentos de indução de embriões em ECS, utilizou-se análise de regressão linear. No experimento de ESD foram avaliadas médias de frequência de regeneração e número médio de embriões por explante. Para o experimento de indução de embriões em suspensão celular embriogênica de protoplasto, foi avaliado o número médio de embriões obtidos em cada tratamento. Os resultados alcançados neste estudo, demonstraram que o clone 2 foi mais responsivo na embriogênese somática quando comparado aos clones 14 e 22, tanto em maiores frequências de regeneração de explantes, quanto em números de embriões por cada explante regenerado, indicando assim que a ESD é uma técnica altamente dependente do genótipo. Para o experimento da influência de diferentes regiões da folha na resposta embriogênica, não foi verificado diferenças entre as médias obtidas, assim como para diferentes protocolos utilizados. Tratando-se da indução de formação de embriões somáticos de ECS, foi observado a produção de embriões somente no meio de cultura enriquecido com 30 gL-1sacarose e acrescido de ABA, não havendo diferença significativas entre diferentes concentrações de do regulador de crescimentona formação de embriões. Desta forma, conclui-se com este trabalho que é possível utilizar a ESD como forma de regeneração de embriões geneticamente editados, bem como a aplicação de protoplastos na edição do cafeeiro, embora ainda sejam necessários estudos mais aprofundados em relação ao aumento da frequência de regeneração e seu posterior amadurecimento.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Publicador: dc.publisherUniversidade Federal de Lavras-
Publicador: dc.publisherPrograma de Pós-Graduação em Agronomia/Fisiologia Vegetal-
Publicador: dc.publisherUFLA-
Publicador: dc.publisherbrasil-
Publicador: dc.publisherDepartamento de Biologia (DBI)-
Publicador: dc.publisherEscola de Ciências Agrárias de Lavras (ESAL)-
Direitos: dc.rightsacesso aberto-
Palavras-chave: dc.subjectProtoplastos-
Palavras-chave: dc.subjectEmbriogênese somática-
Palavras-chave: dc.subjectCafé-
Palavras-chave: dc.subjectCultivo in-vitro-
Palavras-chave: dc.subjectProtoplasts-
Palavras-chave: dc.subjectSomatic embryogenesis-
Palavras-chave: dc.subjectCoffee-
Palavras-chave: dc.subjectIn-vitro cultivation-
Palavras-chave: dc.subjectCoffea canephora-
Palavras-chave: dc.subjectCiências Agrárias-
Título: dc.titleIndução de embriões somáticos em diferentes clones de Coffea canephora-
Título: dc.titleInduction of somatic embryos in different clones of Coffea canephora-
Tipo de arquivo: dc.typedissertação-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional da Universidade Federal de Lavras (RIUFLA)

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