Desenvolvimento de Métodos por CLAE para o Monitoramento da Atividade da Enzima 5’-deoxi-5’-Metiltioadenosina Fosforilase de Schistosoma Mansoni.

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorMoraes, Marcela Cristina de-
Autor(es): dc.contributorCerqueira, Eduardo Coelho-
Autor(es): dc.contributorAbreu, Lucas Silva-
Autor(es): dc.creatorAbreu, Miguel Franco Sepulvida de-
Data de aceite: dc.date.accessioned2025-08-21T20:10:11Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2025-08-21T20:10:11Z-
Data de envio: dc.date.issued2025-02-24-
Data de envio: dc.date.issued2025-02-24-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://app.uff.br/riuff/handle/1/36902-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/1053738-
Descrição: dc.descriptionA esquistossomose, causada pelo parasita Schistosoma mansoni, é uma doença tropical negligenciada, cujo tratamento se encontra limitado a poucos fármacos considerados ineficientes e associados a efeitos colaterais adversos. A busca por novas alternativas terapêuticas motivou o estudo de inibidores enzimáticos como estratégia potencial. Neste trabalho, desenvolveu-se um método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência com detecção ultravioleta (CLAE-UV) para o monitoramento da atividade catalítica da enzima 5’-deoxi-5’-metiltioadenosina fosforilase (SmMTAP). O método analítico foi validado avaliando-se linearidade, precisão, exatidão, seletividade e limites de detecção e quantificação, em conformidade com a legislação vigente. Então, a enzima SmMTAP foi expressa, purificada e imobilizada covalentemente em dois diferentes suportes sólidos: capilares de sílica fundida e nanopartículas magnéticas. No entanto, os reatores em sílica fundida apresentaram atividade muito baixa, mesmo após sucessivas otimizações. Já a enzima SmMTAP imobilizada em nanopartículas magnéticas (MNP@SmMTAP) apresentou atividade cerca de 5 vezes maior que o capilar, além capacidade de reter cerca de 50% de sua atividade inicial por até 14 dias. Ensaios de reusabilidade indicaram manutenção de 50% da atividade inicial até o quinto ciclo reacional, com uma queda gradual a 25% após sete ciclos. Além disso, apresentou constante de Michaelis-Menten cerca de 10 vezes maior que o descrito pela literatura para a enzima livre. Desta forma, a abordagem inovadora de imobilização da SmMTAP em nanopartículas magnéticas viabilizou o desenvolvimento de um ensaio de quantificação direta de adenina, em um sistema capaz de reaproveitar a capacidade catalítica da enzima por período determinado. Esta abordagem pode, portanto, contribuir significativamente para a pesquisa de novos fármacos contra a esquistossomose, ao permitir a identificação de compostos inibidores da SmMTAP de forma precisa e eficiente.-
Descrição: dc.description62 f.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Direitos: dc.rightsOpen Access-
Direitos: dc.rightsCC-BY-SA-
Palavras-chave: dc.subjectEsquistossomose.-
Palavras-chave: dc.subjectSmMTAP-
Palavras-chave: dc.subjectCromatografia a líquido de alta eficiência-
Palavras-chave: dc.subjectTriagem de inibidores. enzimas imobilizadas-
Palavras-chave: dc.subjectCromatografia líquida-
Título: dc.titleDesenvolvimento de Métodos por CLAE para o Monitoramento da Atividade da Enzima 5’-deoxi-5’-Metiltioadenosina Fosforilase de Schistosoma Mansoni.-
Tipo de arquivo: dc.typeTrabalho de conclusão de curso-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional da Universidade Federal Fluminense - RiUFF

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