Avaliação dos efeitos in vitro e in vivo da N-acetilcisteína em macrófagos J774A.1 e camundongos C57BL/6 expostos ao formaldeído.

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorBezerra, Frank Silva-
Autor(es): dc.contributorBezerra, Frank Silva-
Autor(es): dc.contributorSouza, Bruna Romana de-
Autor(es): dc.contributorCeron, Carla Speroni-
Autor(es): dc.contributorMenezes, Rodrigo Cunha Alvim de-
Autor(es): dc.contributorValença, Samuel dos Santos-
Autor(es): dc.creatorMarcano Gómez, Elena Cecilia-
Data de aceite: dc.date.accessioned2025-08-21T15:51:51Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2025-08-21T15:51:51Z-
Data de envio: dc.date.issued2025-03-12-
Data de envio: dc.date.issued2023-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/19911-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/capes/1026078-
Descrição: dc.descriptionPrograma de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.-
Descrição: dc.descriptionNeste estudo foram avaliados os efeitos da N-acetilcisteína (NAC) no desequilíbrio redox e na inflamação em células e camundongos adultos expostos ao formaldeído (FA). Inicialmente, o potencial antioxidante do NAC foi determinado pelos métodos dos radicais DPPH• e ABTS, testando concentrações de NAC entre 7,5 e 80 μg/mL. Foi avaliada no ensaio in vitro a viabilidade de macrófagos murinos J774A.1 incubados com FA a 25, 50, 100, 200 e 400 mM e NAC a 1 e 10 mM por 8, 16 e 24 horas. A produção intracelular de espécies reativas de oxigênio (EROs) foi determinada em macrófagos incubados com FA a 50 mM por 16 h, NAC a 1 e 10 mM por 8 h e incubados com FA e NAC nas duas concentrações anteriores. Para o estudo in vivo, 96 camundongos machos C57BL/6 foram divididos aleatoriamente em 6 grupos de 8 animais cada: um controle exposto ao ar ambiente (GC), um veículo que recebeu solução salina por gavagem orogástrica (GV), um exposto a FA 1% por inalação (GF) e três grupos expostos a FA 1% e tratados 1 hora depois com NAC 100, 150 e 200 mg/kg por gavagem orogástrica (FN100, FN150 e FN200). Foram realizados um experimento in vivo de curto (5 dias) e longo prazo (6 meses). Em cada experimento, 24 horas após a última exposição ao FA e administração de NAC foi realizada a determinação dos parâmetros ventilatórios e biométricos, a coleta de sangue, lavado broncoalveolar (LBA) e pulmões para as contagens de células e as análises bioquímicas e histológicas. NAC apresentou capacidade antioxidante pela redução dos radicais DPPH• e ABTS. No ensaio in vitro, FA promoveu uma diminuição na viabilidade e um aumento na produção de EROs, enquanto, NAC reduziu a produção de EROs induzida por FA. Valores baixos de EROs foram encontrados em macrófagos de todos os grupos tratados com NAC. No experimento de curto prazo, os tratamentos não causaram alterações nos parâmetros ventilatórios e biométricos. Em animais a exposição ao FA promoveu um aumento nas contagens de leucócitos em sangue e no LBA e induziu secreção dos marcadores inflamatórios IL-6, IL-15 e IL-10, promoveu desequilíbrio redox e dano oxidativo caracterizado por aumento da atividade da SOD (superóxido dismutase), CAT (catalase), diminuição da relação glutationa reduzida/glutationa oxidada (GSH/GSSG), bem como aumento dos níveis de proteínas carbonilas e da peroxidação lipídica. Um aumento na densidade de volume do espaço aéreo alveolar (Vv [ea]) e uma diminuição na densidade de volume do septo alveolar (Vv [sa]) foi promovido pela exposição ao FA em comparação com os grupos GC e GV. No experimento de longo prazo, o FA diminuiu a massa corporal e aumentou a massa pulmonar relativa nos camundongos. As contagens totais e diferenciais de leucócitos no sangue diminuíram pela exposição ao FA, enquanto o influxo de células inflamatórias para as vias aéreas respiratórias diminuiu. Foram observados no grupo GF aumentos nos níveis de proteínas carboniladas e de substancias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) acompanhados com mudanças nas defensas antioxidantes enzimáticas como aumentos na atividade da SOD e diminuição da CAT. Marcadores do estado redox mostraram alterações induzidas pelo FA como aumentos nos níveis de grupos sulfidrilas e diminuições nos níveis de GSH. Respostas inflamatórias foram observadas com aumentos nos níveis de IL-6, IL-15, IL-13 e IL-10. Danos teciduais foram observados por diminuição na Vv [a] e o LM e por aumento na Vv [sa] e estiveram acompanhados de efeitos nos parâmetros ventilatórios como diminuição na frequência respiratória e aumento no volume corrente. A atividade da MMP9 como marcador de remodelação tecidual diminuiu com a exposição. A administração de NAC atenuou no curto e longo prazo marcadores de estresse oxidativo, a secreção de mediadores inflamatórios, a inflamação pulmonar e os danos no pulmão. Os resultados demostram que tanto no modelo in vitro como in vivo NAC exerceu efeitos protetores que modularam a resposta inflamatória e o desequilíbrio redox, evitando principalmente no curto prazo com a eliminação de EROs o desenvolvimento lesões nos pulmões dos camundongos e os efeitos deletéreos na função respiratoria induzidos pela exposição.-
Descrição: dc.descriptionIn this study, the effects of N-acetylcysteine (NAC) on redox imbalance and inflammation in adult cells and mice exposed to formaldehyde (FA) were evaluated. Initially, the antioxidant potential of NAC was determined by the DPPH• and ABTS radical methods, testing NAC concentrations between 7.5 and 80 μg/mL. The viability of J774A.1 murine macrophages incubated with FA at 25, 50, 100, 200 and 400 mM and NAC at 1 and 10 mM for 8, 16 and 24 hours was evaluated in the in vitro assay. The intracellular production of reactive oxygen species (ROS) was determined in macrophages incubated with FA at 50 mM for 16 h, NAC at 1 and 10 mM for 8 h and incubated with FA and NAC at the two previous concentrations. For the in vivo study, 96 male C57BL/6 mice were randomly divided into 6 groups of 8 animals each: a control exposed to air (CG), a vehicle that received saline solution by orogastric gavage (VG), one exposed to FA 1% by inhalation (FG) and three groups exposed to FA 1% and treated 1 hour later with NAC 100, 150 and 200 mg/kg by orogastric gavage (FN100, FN150 and FN200). A short-term (5 days) and long-term (6 months) in vivo experiment was carried out. In each experiment, 24 hours after the last exposure to FA and administration of NAC, ventilation and biometric parameters were determined, blood, bronchoalveolar lavage (BAL) and lungs were collected for cell counts and biochemical and histological analyses. NAC showed antioxidant capacity by reducing DPPH• and ABTS radicals. In the in vitro assay, FA promoted a decrease in viability and an increase in ROS production, while NAC reduced the production of ROS induced by FA. Low ROS values were found in macrophages from all groups treated with NAC. In the short-term experiment, the treatments did not cause changes in ventilatory and biometric parameters. In animals, exposure to FA promoted an increase in leukocyte counts in blood and BAL and induced secretion of the inflammatory markers IL-6, IL-15 and IL-10, promoting redox imbalance and oxidative damage characterized by increased SOD activity (superoxide dismutase), CAT (catalase), decreased reduced glutathione/oxidized glutathione (GSH/GSSG) ratio, as well as increased levels of protein carbonyls and lipid peroxidation. An increase in alveolar air space volume density (Vv [ea]) and a decrease in alveolar septum volume density (Vv [sa]) was promoted by FA exposure compared to the CG and VG groups. In the long-term experiment, FA decreased body mass and increase relative lung mass in mice. Total and differential blood leukocyte counts were decreased by FA exposure, while the influx of inflammatory cells into the respiratory airways decreased. Increases in the levels of carbonyl proteins and thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) were observed in the FG group, accompanied by changes in enzymatic antioxidant defenses such as increases in SOD activity and a decrease in CAT. Redox state markers showed FA-induced changes such as increases in the levels of sulfhydryl groups and decreases in the levels of GSH. Inflammatory responses were observed with increases in the levels of IL-6, IL-15, IL-13 and IL-10. Tissue damage was observed by a decrease in Vv [a] and LM and by an increase in Vv [sa] and was accompanied by effects on ventilatory parameters such as a decrease in respiratory rate and an increase in tidal volume. MMP9 activity as a marker of tissue remodeling decreased with exposure. NAC administration attenuated short- and long-term markers of oxidative stress, the secretion of inflammatory mediators, lung inflammation and lung damage. The results demonstrate that both in the in vitro and in vivo models, NAC exerted protective effects that modulated the inflammatory response and redox imbalance, mainly preventing, in the short term with the elimination of ROS the development of lesions in the lungs of mice and the deleterious effects on respiratory function induced by exposure.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Direitos: dc.rightsaberto-
Direitos: dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 United States-
Direitos: dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/us/-
Direitos: dc.rightsAutorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 24/02/2025 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação.-
Palavras-chave: dc.subjectFormaldeído-
Palavras-chave: dc.subjectN-acetilcisteína-
Palavras-chave: dc.subjectMacrófagos J774A.1-
Palavras-chave: dc.subjectCamundongos C57BL/6-
Palavras-chave: dc.subjectEstresse oxidativo-
Título: dc.titleAvaliação dos efeitos in vitro e in vivo da N-acetilcisteína em macrófagos J774A.1 e camundongos C57BL/6 expostos ao formaldeído.-
Tipo de arquivo: dc.typelivro digital-
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