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Resposta a danos no DNA promovidos pela exposição ao arsênio em fibroblastos humanos.
Use este link compartilhar ou citar este material: http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/1024509
Registro completo de metadados
| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Garcia, Camila Carrião Machado | - |
| Autor(es): dc.contributor | Garcia, Camila Carrião Machado | - |
| Autor(es): dc.contributor | Teixeira, Mônica Cristina | - |
| Autor(es): dc.contributor | Sanchez, Angelica Bianchini | - |
| Autor(es): dc.creator | De León, Álvaro José Benítez | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-08-21T15:48:19Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-08-21T15:48:19Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-08-01 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-08-01 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2023 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/18195 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/capes/1024509 | - |
| Descrição: dc.description | Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. | - |
| Descrição: dc.description | O arsênio (As) inorgânico é um semimetal encontrado em níveis moderados na crosta terrestre, amplamente encontrado nas formas arsenito (As3+) ou arsenato (As5+). É um dos carcinógenos conhecidos mais antigos do mundo e classificado como classe I pela Agência Internacional de Pesquisa do Câncer (IARC). A exposição ao As induz a formação de Espécies Reativas (ERs), que são responsáveis por danos diretos às biomoléculas, modulação de vias de sinalização celular e marcadores epigenéticos. Além disso, o As promove alterações no ciclo celular, proliferação e apoptose. Evidências apontam que o arsenito é capaz de inibir vias de reparo de DNA, seja pela degradação de proteínas via proteassomo, seja pela diminuição da quantidade de expressão gênica. No entanto, o entendimento de quais danos de DNA são induzidos pela exposição ao arsenito, bem como o funcionamento do reparo de DNA e sua consequente mutagênese precisam ser melhor investigados. Neste contexto, por meio da exposição aguda (6 horas) ao arsenito de sódio em fibroblastos de pulmão humano (células MRC-5), pretendemos entender os mecanismos de respostas aos danos de DNA e modulação das vias associadas à exposição ao semimetal. Ensaio de viabilidade celular demonstrou que o arsenito é altamente citotóxico (IC50 – 20 μM), com tendência de indução de crescimento celular nas doses menores que 5 μM. Análises do ciclo celular por citometria de fluxo com marcação de Iodeto de propídio revelaram que As3+ induz bloqueio de ciclo celular seguido da indução de mecanismos de morte celular dose dependente. Ademais, o ensaio cometa alcalino e modificado, com o uso da enzima Formamido Pirimidina DNA Glicosilase (FPG), revelou que o arsenito é capaz de induzir altos índices de dano ao DNA, incluindo por oxidação, imediatamente ao final da exposição. Por fim, Análises proteômica por LC−MS/MS label-free shotgun mostram que o arsenito é capaz de modular proteínas estruturais e relacionadas com processos redox, como a tioredoxina redutase, além de, alterar processos biológicos relacionados ao reparo de DNA, na concentração de 30 μM, 12 horas após exposição. Em conjunto, estes resultados contribuem para o entendimento dos efeitos do arsenito nas diferentes doses e tempo após exposição aguda no DNA e proteínas, podendo contribuir para ampliar o conhecimento e o entendimento dos mecanismos mutagênicos e carcinogênicos induzidos pelo semimetal. | - |
| Descrição: dc.description | Inorganic arsenic (iAs) is a metalloid found at moderate levels in the Earth's crust, widely present in the forms of arsenite (As3+) or arsenate (As5+). It is one of the oldest known carcinogens classified as a Group I by IARC. Arsenic exposure induces the formation of reactive oxygen species (ROS), which are responsible for direct damage to biomolecules, modulation of cellular signaling pathways, and epigenetic markers. Additionally, arsenic promotes alterations in the cell cycle, proliferation, and apoptosis. Evidence suggests that arsenite can inhibit DNA repair pathways, either through protein degradation via the proteasome or by decreasing gene expression. However, the understanding of which DNA damages are induced by arsenite exposure, as well as the functioning of DNA repair and subsequent mutagenesis needs further investigation. In this context, through acute exposure (6 hours) to sodium arsenite in human lung fibroblasts (MRC-5 cells), we aim to understand the mechanisms responding to DNA damage and modulation of associated pathways after arsenite exposure. Cell viability assays demonstrate that arsenite is highly cytotoxic (IC50 – 20 μM), with a tendency to induce cell growth at doses lower than 5 μM. Cell cycle analysis by flow cytometry with propidium iodide labeling revealed that As3+ induces cell cycle block followed by the induction of dose-dependent cell death mechanisms. Furthermore, Alkaline and modified comet assay, using Formamido Pyrimidine DNA glycosylase (FPG), revealed that arsenite is able to induce high rates of DNA damage, including oxidation, immediately after treatment. Finally, proteomic analysis by LC−MS/MS label-free shotgun revealed that arsenite is capable of modulating structural and related to redox processes proteins, such as thioredoxin reductase, in addition to altering biological processes related to DNA repair, at the concentration of 30 μM, 12 hours after exposition. Taken together, these results contribute to the understanding of the effects of arsenite at different doses and time after acute exposure on DNA and proteins. It can contribute to expanding knowledge and understanding of the mutagenic and carcinogenic mechanisms induced by the metalloid. | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Idioma: dc.language | pt_BR | - |
| Direitos: dc.rights | aberto | - |
| Direitos: dc.rights | Attribution-ShareAlike 3.0 United States | - |
| Direitos: dc.rights | http://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/us/ | - |
| Direitos: dc.rights | Autorização concedida ao Repositório Institucional da UFOP pelo(a) autor(a) em 04/07/2024 com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que sejam citados o autor e o licenciante. | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Arsenito | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Reparo de DNA | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Resposta a danos de DNA | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Processos redox | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Proteômica | - |
| Título: dc.title | Resposta a danos no DNA promovidos pela exposição ao arsênio em fibroblastos humanos. | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - UFOP | |
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