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| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Zanata, Silvio Marques, 1974- | - |
| Autor(es): dc.contributor | Bueno, Mariane Pagno de Souza, 1999- | - |
| Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Biomedicina | - |
| Autor(es): dc.creator | Souza, Kelly Carolina Sarmento de | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-09-01T10:39:59Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-09-01T10:39:59Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-10-23 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2024-10-23 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2023 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/1884/90381 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/90381 | - |
| Descrição: dc.description | Orientador: Prof. Dr. Silvio Marques Zanata | - |
| Descrição: dc.description | Coorientador: MSc. Mariane Pagno de Souza Bueno | - |
| Descrição: dc.description | Monografia (graduação) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Curso de Graduação em Biomedicina. | - |
| Descrição: dc.description | Inclui referências | - |
| Descrição: dc.description | Resumo : A ubiquitina é uma proteína de 76 aminoácidos que controla diversos processos celulares, sendo um dos mais relevantes a degradação de proteínas a partir do proteassoma 26S. Esta proteína é encontrada no organismo a partir de genes precursores, como o UBB. As enzimas deubiquitinases removem as cadeias de ubiquitina de proteínas e são classificadas em 7 diferentes famílias, sendo uma delas a família USP. A USP2a está envolvida em adenocarcinomas de próstata humana e há poucos inibidores disponíveis para essa enzima no mercado, o que limita a USP2a como alvo terapêutico. Além da própria USP2a purificada, a obtenção do substrato UBB é etapa fundamental no desenvolvimento de ensaios de deubiquitinase na aceleração das pesquisas para obtenção e caracterização de novos inibidores para a USP2a. Para a expressão recombinante de UBB, foi feito um ensaio de expressão em pequena escala do vetor pET24a-HsUB, seguido de uma avaliação com três meios diferentes: LB, ZYM e TB. Como resultado, mostrou-se mais adequada a condição de expressão em meio ZYM (pré-inóculo em LB), a qual foi empregada em etapas subsequentes em média escala (0,5 L). A purificação da UBB foi feita por cromatografia de afinidade a metal (Ni-NTA agarose), sendo que o rendimento total de proteína foi estimada em 1,1 mg/L e a pureza obtida para a UBB foi adequada para a utilização como substrato para o ensaio de deubiquitinase. O ensaio utilizando extratos de células superexpressando USP2a e USP2a recombinante evidenciou a atividade proteolítica da USP2a sobre UBB, sugerindo que a poli-ubiquitina pode ser usada em ensaio de deubiquitinase para identificar inibidores da USP2a | - |
| Formato: dc.format | 1 recurso online : PDF. | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Proteínas | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Ubiquitina | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Aminoácidos | - |
| Título: dc.title | Produção recombinante do precursor de ubiquitina UBB (tetra ubiquitina) e seu uso como substrato em ensaio de deubiquitinase | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo | |
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