Desenvolvimento de um ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) indireto para detectar a soroconversão de SARS-CoV-2 em humanos

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Autor(es): dc.contributorHuergo, Luciano Fernandes, 1978--
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor Litoral. Curso de Graduação em Gestão Ambiental-
Autor(es): dc.creatorConzentino, Marcelo dos Santos-
Data de aceite: dc.date.accessioned2025-09-01T12:17:28Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2025-09-01T12:17:28Z-
Data de envio: dc.date.issued2023-05-23-
Data de envio: dc.date.issued2023-05-23-
Data de envio: dc.date.issued2020-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/82769-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/82769-
Descrição: dc.descriptionOrientador: Luciano Fernandes Huergo-
Descrição: dc.descriptionMonografia (graduação) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Litoral, Curso de Graduação em Gestão Ambiental-
Descrição: dc.descriptionInclui referências-
Descrição: dc.descriptionResumo: SARS-CoV-2 é um novo coronavírus membro da ordem Nidovirales, família Coronaviridae, gênero Betacoronavírus, em 2019 foi responsável por causar uma nova doença respiratória aguda conhecida como COVID-19, que se espalhou rapidamente fazendo com que a Organização Mundial da Saúde (OMS) decretasse como uma pandemia mundial em março de 2020. Para detectar a soroconversão de anticorpos anti-SARS-CoV-2 (agente etiológico da COVID-19) em humanos e realizar estudos epidemiológicos é necessário um teste sorológico de produção nacional e que tenha baixo custo. O objetivo deste estudo foi desenvolver um ensaio de Imunoabsorção Enzimática ELISA Indireto para detecção de anticorpos IgG antiSARS-CoV-2 em amostras de soro e/ou plasma humano. A proteína recombinante do Nucleocapsídeo de SARS-CoV-2 fusionada a uma cauda e 6 histidinas foi expressa em células de Escherichia coli (BL21) e purificada por cromatografia de afinidade em coluna Hi-Trap-Chelating-NI 2+ (GE HEALTHCARE), em seguida foi analisada por SDS-PAGE. A proteína purificada foi utilizada para revestir placas de polistireno de 96 poços. Estas placas foram utilizadas para reação de ELISA indireto usando antiIgG humano marcado com a enzima peroxidase HPR, as reações foram reveladas com substrato cromogênico. A sensibilidade do ensaio foi avaliada usando amostras de soro de 140 casos confirmados de COVID-19. A especificidade foi determinada testando 210 amostras de controles negativos pré-pandêmicos de soro humano. Os valores de densidade óptica bruta (OD450nm) foram determinados e expressos como porcentagem de uma amostra referência ao longo da validação do método. A análise da curva de Características de Operação do Receptor (ROC) e a Análise de Área sob Curva (AUC) foram realizadas para avaliar o desempenho do ELISA desenvolvido. O valor de corte do ELISA Indireto validado foi definido em 12,5% do sinal em relação a referência, a sensibilidade do ensaio foi de 90% (IC 95%: 83,79% - 94,42%) e a especificidade foi de 98,1% (IC 95%: 95,20% - 99,48%). A ROC apresentou valor de AUC de 0,965 (IC 95%: 94,16% - 98,78%). A acurácia do ensaio desenvolvido foi similar a obtida em kits comerciais.-
Formato: dc.format1 recurso online : PDF.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
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Palavras-chave: dc.subjectTeste imunoenzimatico-
Palavras-chave: dc.subjectProdutos médicos-
Palavras-chave: dc.subjectSARS-CoV-2-
Título: dc.titleDesenvolvimento de um ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) indireto para detectar a soroconversão de SARS-CoV-2 em humanos-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo

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