Sensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori

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Autor(es): dc.contributorRosário Filho, Nelson Augusto, 1949--
Autor(es): dc.contributorZanchin, Nilson Ivo Tonin-
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente-
Autor(es): dc.creatorAraujo, Laura Maria Lacerda, 1980--
Data de aceite: dc.date.accessioned2021-03-09T21:15:50Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2021-03-09T21:15:50Z-
Data de envio: dc.date.issued2021-03-08-
Data de envio: dc.date.issued2021-03-08-
Data de envio: dc.date.issued2019-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/69702-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/69702-
Descrição: dc.descriptionOrientador: Prof. Dr. Nelson Augusto Rosário Filho-
Descrição: dc.descriptionCoorientador: Prof. Dr. Nilson Ivo Tonin Zanchin-
Descrição: dc.descriptionTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do Adolescente. Defesa : Curitiba, 31/01/2018-
Descrição: dc.descriptionInclui referências: p. 54-58-
Descrição: dc.descriptionÁrea de concentração: Alergia e Imunologia Pediátrica-
Descrição: dc.descriptionResumo: : a mariposa do bicho-da-seda é uma fonte significativa de aeroalérgenos. Foi demonstrada alta prevalência de sensibilização a extrato de Bombyx mori em grupo de indivíduos com doenças alérgicas respiratórias, sendo o segundo em frequência de positividade após os ácaros da poeira. Seus alérgenos inalantes podem desencadear sintomas de asma e rinite alérgica em sujeitos predispostos, após exposição domiciliar ou ocupacional. Não há estudos sobre alérgenos desta espécie de mariposa envolvidos em reações alérgicas respiratórias. O objetivo deste estudo foi determinar as principais proteínas alergênicas das asas da mariposa Bombyx mori responsáveis pela sensibilização alérgica de indivíduos diagnosticados com rinite alérgica e/ou asma. Método: foi realizado um estudo experimental em que foram incluídos 36 participantes, submetidos a teste cutâneo alérgico com extrato preparado a partir das asas da mariposa Bombyx mori e seis outros aeroalérgenos padronizados, além de coleta de sangue venoso. Divididos em três grupos: o grupo 1 formado por indivíduos cujo teste cutâneo alérgico foi positivo para extrato de mariposa (n=21), grupo 2 consistiu de sujeitos cujo teste alérgico foi positivo para ácaro da poeira (n=8) e grupo 3 composto por não alérgicos e cujo teste cutâneo foi negativo para todos os alérgenos testados, como controles negativos (n=7). A partir dos respectivos soros, foi feito Western blot com extrato de asas de mariposa utilizando anticorpos anti-IgE. Foi desenvolvida técnica de cromatografia por imunoafinidade para purificar as proteínas a partir do extrato bruto de Bombyx mori, que também foi analisado por Immunoblot, usando pool de soros dos participantes dos grupos 1 e 3. Resultados: entre os 21 participantes do grupo 1, dezenove reagiram ao extrato de Bombyx mori por Western blot. Todos reagiram à banda de 80 kDa, cinco outras bandas (66, 50, 45, 37 e 30 kDa) foram identificadas em mais de 50% dos indivíduos testados, consideradas proteínas major. Dos 8 participantes do grupo 2, sete mostraram reatividade ao extrato de mariposa por Western blot. Estes mesmos reagiram à banda de 66 kDa e duas outras (50 e 40 kDa) foram identificadas em mais de 50% dos sujeitos testados. Amostras de soro dos indivíduos saudáveis não reagiram ao extrato de Bombyx mori. SDS-PAGE a partir de cromatografia por imunoafinidade identificou as bandas 150, 120, 100, 80, 66, 50, 45, 37, 30, 25, 17 kDa. Todas presentes no extrato bruto dos indivíduos positivos para mariposa por immunoblot. Baseado em bancos de dados de pesquisa sobre as massas moleculares já descritas para Bombyx mori, foi possível identificar 5 das 6 proteínas principais reagentes nos imunoensaios. A proteína de 80 kDa foi visualizada em todos os participantes reagentes do grupo 1 e em nenhum dos pacientes do grupo 2, sendo um potencial alérgeno específico da asa da mariposa. Conclusão: este foi o primeiro estudo a destacar as principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori em indivíduos diagnosticados com doenças alérgicas respiratórias a partir de extrato preparado com as asas desta espécie de inseto. Palavras-chave: Bombyx, alérgenos, asma, rinite alérgica.-
Descrição: dc.descriptionAbstract: Background: silkworm moth is a significant source of aeroallergens. High prevalence of sensitization to Bombyx mori extract was demonstrated in a group of individuals with allergic respiratory diseases, being the second in frequency of positivity, after house dust mites. Its inhalant allergens might trigger symptoms of asthma and allergic rhinitis in predisposed subjects, after home or occupational exposure. There are no studies on these moth species allergens involved in allergic respiratory reactions. The aim of this study was to determine the major allergenic proteins of Bombyx mori moth's wings responsible for allergic sensitization of individuals diagnosed with allergic rhinitis and/or asthma. Method: an experimental study was performed in which 36 participants were included, all submitted to skin prick test with Bombyx mori's wings and other six aeroallergens standardized extracts, as well as blood samples collection. They were divided into three groups: group 1 consisted of 21 blood samples collection from skin prick test positive to Bombyx mori extract allergic participants (group 1), eight samples from mite skin prick test positive extract allergic subjects (group 2) and 7 samples from negative non allergic controls (group 3). From respective sera, Western blot was performed with moth's wings extract using anti-IgE antibodies. Immunoaffinity chromatography was developed in order to purify the proteins from Bombyx mori crude extract, which were also analysed by Immunoblot, using groups 1 and 3 participants pooled sera. Results: among the 21 participants from group 1, nineteen reacted to moth extract by Western blot. All reacted to a protein at 80 kDa, five other bands (66, 50, 45, 37 e 30 kDa) were identified in more than 50% of individuals tested, considered major proteins. From 8 participants of group 2, seven showed reactivity to moth extract by Western blot. Those same reacted to a protein at 66 kDa and other two (50 e 40 kDa) were identified in more than 50% of the subjects tested. Sera samples from healthy individuals did not react to Bombyx mori extract. SDS-PAGE from immunoaffinity chromatography identified bands at 150, 120, 100, 80, 66, 50, 45, 37, 30, 25, 17 kDa. All present in Immunoblot from moth extract positive individuals. Based on research databank on molecular mass already described to Bombyx mori, it was possible to identify 5 from 6 major proteins reactive on immunoassays. The 80 kDa protein was seen in all reactive participants from group 1 and in none of the patients from group 2, being a potential specific allergen from moth's wings. Conclusion: this was the first study to highlight the major allergenic proteins of Bombyx mori moth in individuals diagnosed with allergic respiratory diseases from extract prepared from this insect species wings. Key words: Bombyx, allergens, asthma, rhinitis, allergic-
Formato: dc.format79 p. : il. (algumas color.).-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
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Palavras-chave: dc.subjectAlérgenos-
Palavras-chave: dc.subjectAsma-
Palavras-chave: dc.subjectRinite alergica-
Palavras-chave: dc.subjectBicho-da-seda-
Palavras-chave: dc.subjectPediatria-
Título: dc.titleSensibilização alérgica e identificação das principais proteínas alergênicas da mariposa Bombyx mori-
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