Purificação, caracterização química e efeito citotóxico em células de glioblastoma humano de pectinas da polpa da gabiroba (Campomanesia xanthocarpa Berg.)

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorSilveira, Joana Léa Meira, 1962--
Autor(es): dc.contributorWinnischofer, Sheila Maria Brochado, 1976--
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)-
Autor(es): dc.creatorAmaral, Sarah da Costa-
Data de aceite: dc.date.accessioned2021-03-09T21:13:10Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2021-03-09T21:13:10Z-
Data de envio: dc.date.issued2021-03-05-
Data de envio: dc.date.issued2021-03-05-
Data de envio: dc.date.issued2018-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/69637-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/69637-
Descrição: dc.descriptionOrientadora : Profª Drª Joana Léa Meira Silveira-
Descrição: dc.descriptionCoorientadora : Profª Drª Sheila Maria Brochado Winnischofer-
Descrição: dc.descriptionDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica). Defesa : Curitiba, 29/03/2018-
Descrição: dc.descriptionInclui referências-
Descrição: dc.descriptionResumo : A flora brasileira detém a maior diversidade do mundo, com mais de 55.000 espécies catalogadas. Entretanto, grande quantidade de espécies de frutos exóticos nativos continuam pouco explorados. A Campomanesia xanthocarpa Berg, conhecida popularmente como gabiroba, é uma espécie nativa de árvore frutífera lenhosa pertencente à família Myrtaceae que, apesar de ser utilizada pela medicina tradicional para o tratamento de diversos tipos de patologias, ainda permanece com uso e comercialização restritos. Alguns estudos têm comprovado o potecial farmacológico da gabiroba, nos quais foram descritas diversas propriedades biológicas para extratos de folhas, sementes e frutos, como: redução da obesidade, da glicemia e dos níveis de colesterol, além de apresentarem atividade antioxidante, anti-inflamatória e antimicrobiana. Apesar disso, a maioria dos trabalhos descritos na literatura associam as propriedades medicinais da C. xanthocarpa aos compostos de baixa massa molar presentes no extratos e, até o presente momento, inexistem estudos que relacione a atividade biológica com os polissacarídeos presentes na polpa desse fruto. Nos últimos anos, as pectinas comerciais vem sendo investigadas quanto às suas propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e antitumoral. Neste contexto, os glioblastomas, um dos tumores malignos mais letais em humanos e mais prevalentes do cérebro, foram escolhidos no presente trabalho como modelo a ser testado para avaliar o potencial antitumoral das pectinas de polpa de gabiroba. Para atingir este objetivo, as pectinas extraídas da polpa de gabiroba foram caracterizadas estruturalmente e avaliadas quanto ao efeito citotóxico. A fração bruta GW extraída da polpa de gabiroba com água quente foi submetida a processos de fracionamento por congelamento e degelo e tratamento com solução de Fehling, obtendo-se a fração purificada GWP-FP-S. Através da análise de HPSEC-MALLS-RI foi possível observar o perfil homogêneo da fração GWP-FP-S, a qual apresentou massa molar de 29.170 g mol-1. A análise de composição monossacarídica da fração GWP-FP-S resultou em ácido galacturônico (58,8%), arabinose (28,5%), galactose (11,3%) e ramnose (1,1%). 57,7% da cadeia de GWP-FP-S foi atribuída a homogalacturonana (HG) e 42,0% a ramnogalacturonana do tipo I (RG-I). A presença dessas cadeias foram confirmadas pelas análises de RMN de 1H e 13C (1D e 2D). As fração bruta (GW) e purificada (GWP-FP-S) foram analisadas quanto ao efeito citotóxico em células de glioblastoma humano (U251-MG) e em células não tumorais (NIH 3T3). Ambas as frações obtidas da polpa da gabiroba induziram citotoxicidade em células U251-MG (19,55-37,65% de inibição da viablidade celular) quando avaliadas pelos métodos de MTT e cristal violeta, após 48h de tratamento nas concentrações de 10-400 yg mL-1. Em contraste, tanto GW quanto GWP-FP-S não foram citotóxicas para células NIH 3T3 nas condições testadas. A caracterização estrutural das frações pécticas de polpa de gabiroba associadas ao efeito citotóxico em células de glioblastoma humano contribuem para valorização da espécie bem como sua preservação. Vale ressaltar que o presente estudo descreve pela primeira vez, o potencial antitumoral de polissacarídeos extraídos de frutos da família Myrtaceae e o efeito citotóxico de pectinas em células de glioblastoma humano. Palavras-chave: Campomanesia xanthocarpa Berg. Gabiroba. Família Myrtaceae Pectinas. Purificação. Estrutura química. Citotoxicidade. Glioblastoma.-
Descrição: dc.descriptionAbstract : The Brazilian flora harbors the world's largest diversity, presenting over 55,000 catalogued species. However, several exotic native fruits continue to be underexploited. Campomanesia xanthocarpa Berg, popularly known as gabiroba, is one of Brazilian native edible specie of the Myrtaceae family used in folk medicine to treat different pathologies, however, the use and commercialization are still restrict. Scientific studies have been confirmed that the leaves and fruit extracts of C. xanthocarpa exhibits a broad spectrum of therapeutic effects, including reduction of obesity, glycemia and cholesterol levels, in addition to antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial properties. However, most of the previously studies attributed the aforementioned health benefits to low molar mass compounds contained on the extracts of C. xanthocarpa, and, since to date, reports about the bioactivity of polysaccharides from gabiroba pulp was not found. In recent decades, commercial pectins have been attracted attention due to their antioxidant, antiinflammatory and antitumor properties. In this context, glioblastoma, the most frequent and lethal primary malignant brain tumor, was selected in the present work as a model to evaluate the antitumor potential of pectins from gabiroba pulp. Thus, to achieve this aim, the pectins extracted from the gabiroba pulp had its chemical structures characterized and evaluated for its cytotoxic effect. A crude pectin GW extracted with hot water from gabiroba pulp was subjected to freeze-thawing processes and fractionation with Fehling's solution, yielding a purified GWP-FP-S fraction. By HPSEC-MALLS-RI analysis, it was possible to observe the homogeneous profile of GWP-FP-S fraction, which had molar mass of 29,170 g mol-1. The monosaccharide composition showed that this fraction was composed of galacturonic acid (58.8%), arabinose (28.5%), galactose (11.3%) and rhamnose (1.1%). 57.7% of GWP-FP-S chain was attributed to homogalacturonans (HG) and 42.0% to type I rhamnogalacturonans (RG-I). The presences of those chains were confirmed through 1H and 13C NMR (1D and 2D) analyzes. Crude (GW) and purified (GWP-FP-S) fractions were evaluated for their cytotoxic effects on human glioblastoma (U251-MG) and normal (NIH 3T3) cells. Both fractions obtained from gabiroba pulp induced cytotoxicity (19.55-37.65% of cell viability inhibition) on U251-MG cells when evaluated by MTT and crystal violet assay, at 10-400 yg mL-1, 48 h of treatment. In contrast, both GW and GWP-FP-S showed no cytotoxicity for normal NIH 3T3 cells at tested conditions. The structural characterizations of the pectic fractions isolated from gabiroba pulp, associated with the evaluation of cytotoxic effect on human glioblastoma cell contribute to the preservation and valorization of this species. It is noteworthy that the present study is reporting for the first time, the antitumor potential of polysaccharides extracted from Myrtaceae family's fruits and on the cytotoxicity of these polysaccharides on glioblastoma cells. Key-words: Campomanesia xanthocarpa Berg. Gabiroba. Myrtaceae family. Pectins. Purification. Chemical structure. Cytotoxicity. Glioblastoma.-
Formato: dc.format107 p. : il. (algumas color.).-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
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Palavras-chave: dc.subjectPectina-
Palavras-chave: dc.subjectGlioblastoma-
Palavras-chave: dc.subjectMirtacea-
Palavras-chave: dc.subjectEstrutura quimica-
Palavras-chave: dc.subjectCitotoxicidade-
Palavras-chave: dc.subjectBioquímica-
Título: dc.titlePurificação, caracterização química e efeito citotóxico em células de glioblastoma humano de pectinas da polpa da gabiroba (Campomanesia xanthocarpa Berg.)-
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