Suplementação perioperatória com probióticos na cicatrização de feridas cutâneas em ratos diabéticos

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Autor(es): dc.contributorMatias, Jorge Eduardo Fouto-
Autor(es): dc.contributorCosta-Casagrande, Thaís Andrade, 1980--
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica-
Autor(es): dc.creatorCampos, Leticia Fuganti-
Data de aceite: dc.date.accessioned2020-09-24T17:24:45Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2020-09-24T17:24:45Z-
Data de envio: dc.date.issued2020-03-28-
Data de envio: dc.date.issued2020-03-28-
Data de envio: dc.date.issued2019-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/66352-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/66352-
Descrição: dc.descriptionOrientador: Prof. Dr. Jorge Eduardo F. Matias-
Descrição: dc.descriptionCoorientadora: Profa. Dra. Thaís Andrade Costa Casagrande-
Descrição: dc.descriptionTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa : Curitiba, 10/12/2019-
Descrição: dc.descriptionInclui referências: p. 68-76-
Descrição: dc.descriptionResumo: Feridas crônicas em pacientes com Diabetes Mellitus (DM) muitas vezes se tornam incuráveis devido à produção prolongada e excessiva de citocinas inflamatórias. O eixo cérebro-intestino-pele propõe que a modulação da microbiota intestinal poderia melhorar a resposta imune sistêmica e influenciar respostas teciduais periféricas. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência da suplementação perioperatória com probióticos no processo de cicatrização cutânea em ratos diabéticos. 46 ratos foram divididos em 4 grupos (C3, P3, C10, P10) conforme tratamento recebido (P: Probiótico - Probiatop®, 250mg/dia, via oral) ou controle (C: maltodextrina, 250mg/dia, via oral) e dia de eutanásia: 3o ou 10o pós operatório (PO). Todos os ratos foram induzidos ao DM 72 horas antes de iniciar o experimento com Aloxana (40mg?kg, via veia caudal). A suplementação foi iniciada 5 dias antes da cirurgia e mantida até a eutanásia. Foi realizada incisão com bisturi guiada por molde quadrado de 2x2cm e as feridas foram deixadas para cicatrizar por segunda intenção. As feridas foram medidas digitalmente para cálculo da área da ferida. A densitometria de colágeno foi feita com coloração Picrosirius Red e analisada com software Image-Pro-Plus 4.5. A histologia foi feita por coloração por Hematoxilina-Eosina (HE) quantificando edema, congestão, polimorfonucleares, fibroblastos, neovasos e monócitos. O estudo imunoistoquímico foi por meio de blocos de Tissue Microarray para análise dos marcadores IL-6, IL-17 e TNF- ? e TGF-?. A contração da ferida foi maior no grupo P10 quando comparado com o grupo C10, o que resultou em menor área cruenta (832±187 vs 1092±250m?2, p=0,011). Houve aumento do colágeno tipo I do 3o para o 10odia de PO no grupo que recebeu probióticos (p=0,016), o que não ocorreu no grupo controle (p=0,487). A análise do escore histológico final por HE mostrou melhor grau de cicatrização no grupo P10 quando comparado com C10 (P10=3 vs. C10=0, p=0,005), com menos polimorfonucleares (p<0,001) e mais neovasos (p=0,001). A IL-17 foi mais baixa no P3 quando comparado ao C3 (83,1±75 vs. 226,2±162,9m?2, p=0,020). O TGF beta foi inferior no P3 quando comparado com o C3 (1448±492 vs.2178±670m?2, p=0,005), e este valor se manteve entre o 3o e o 10o dia de PO (p=0,143), enquanto no grupo controle houve redução (p=0,006). Não houve diferença significativa para os demais parâmetros avaliados. A suplementação perioperatória de probióticos promove aceleração da cicatrização cutânea em ratos diabéticos, possivelmente por se associar a redução da IL-17 e polimorfonucleares e aumentar a neovascularização e a deposição de colágeno tipo I. Palavras-chave: Probióticos. Cicatrização. Diabetes mellitus. Aloxana.-
Descrição: dc.descriptionAbstract: Chronic wounds in patients with Diabetes Mellitus (DM) often become incurable due to prolonged and excessive production of inflammatory cytokines.??The brain-gut-skin axis proposes that modulation of the intestinal microbiota might improve the systemic immune response and affect peripheral tissue responses. The aim of this study was to evaluate the influence of perioperative supplementation with probiotics in the cutaneous healing process in diabetic rats. 46 rats were divided into 4 groups (C3, P3, C10, P10) according to the treatment received (P: Probiotic - Probiatop®, 250mg/day, orally administered) or control (C: maltodextrin, 250mg/day, orally administered) and day of euthanasia: 3rd or 10th postoperative (PO). All rats were induced to DM 72 hours before starting the experiment with Alloxan (40mg per kg of body weight, through the caudal vein). Supplementation was initiated 5 days before the incision and maintained until the day of euthanasia. Scalpel incision was guided by a 2x2cm squared mold and the wounds were left to heal per second-intention. The wounds were digitally measured to calculate the wound area of the wound. Collagen densitometry was done with Picrosirius Red staining and analyzed with Image-Pro-Plus software 4.5. Histological parameters were analyzed by staining by Hematoxylin-Eosin (HE) and quantifying edema, congestion, polymorphonuclear, fibroblasts, neovascularization and monocytes. For the immunohistochemical study, Tissue Microarray blocks were made to analyze the markers IL-6, IL-17, TNF-? and TGF-?. The contraction of the wound was greater in the P10 group when compared to the C10 group, which resulted in a smaller scar area (832±187 vs 1092±250m?2, p=0.011). There was an increase in type I collagen deposition from the 3rd to the 10th PO day in the group receiving probiotics (p=0.016), which did not occur in the control group (p=0.487). The analysis of the final histological score by HE showed a better degree of healing in the P10 group when compared to C10 (P10=3 v. C10=0, p=0.005), with fewer polymorphonuclear (p <0.001) and more neovascularization (p=0.001). IL-17 was lower in P3 when compared to C3 (83.1±75 vs 226.2±162.9m?2, p=0.020). TGF beta was lower in P3 when compared to C3 (1448 ± 492 vs 2178±670m?2, p=0.005), and this value remained similar between the 3rd and 10th POs (p=0.143), whereas in the control group it decreased (p=0.006). There was no significant difference for the other parameters evaluated. Perioperative probiotic supplementation promotes acceleration of cutaneous wound healing in diabetic rats, possibly because it is associated with the reduction of IL- 17 and polymorphonuclear cells and to increased neovascularization and deposition of type I collagen. Key words: Probiotics. Healing. Diabetes mellitus. Alloxan.-
Formato: dc.format79 p. : il. (algumas color.).-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Palavras-chave: dc.subjectProbióticos-
Palavras-chave: dc.subjectCicatrização-
Palavras-chave: dc.subjectDiabetes mellitus-
Palavras-chave: dc.subjectCirurgia-
Título: dc.titleSuplementação perioperatória com probióticos na cicatrização de feridas cutâneas em ratos diabéticos-
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