Avaliação do
Você é humano?
8
5
=
Denunciar conteúdo impróprio
Atenção: Todas as denúncias são sigilosas e sua identidade será preservada.
Os campos nome e e-mail são de preenchimento opcional
Influência da melanogênese sobre funções mitocondriais e autofagia em células de melanoma murino B16-F10
Use este link compartilhar ou citar este material: http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/65351
Registro completo de metadados
| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Martinez, Glaucia Regina | - |
| Autor(es): dc.contributor | Cadena, Silvia Maria Suter Correia, 1967- | - |
| Autor(es): dc.contributor | Heinrich, Tassiele Andréa | - |
| Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica) | - |
| Autor(es): dc.creator | Meira, Willian Vanderlei | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2020-01-31T13:07:29Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2020-01-31T13:07:29Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2020-01-21 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2020-01-21 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2015 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/1884/65351 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/65351 | - |
| Descrição: dc.description | Orientadora : Profª Drª Glaucia Regina Martinez | - |
| Descrição: dc.description | Co-orientadora : Profª Drª Silvia Maria Suter Correia Cadena | - |
| Descrição: dc.description | Co-orientadora : Drª Tassiele Andréa Heinrich | - |
| Descrição: dc.description | Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 25/03/2015 | - |
| Descrição: dc.description | Inclui referências | - |
| Descrição: dc.description | Resumo: O melanoma está entre os mais raros e agressivos tumores que atingem a pele. Devido a sua alta agressividade e seu grande poder de metástase, a sobrevida de pacientes diagnosticados tardiamente é bastante baixa. Um dos principais motivos para a dificuldade no tratamento desse tipo de tumor é a presença da melanina, um pigmento que confere cor à pele, olhos e pelos. A principal função da melanina é proteger as células epiteliais de danos provocados pela radiação solar, através da absorção dessa radiação e da captação de espécies reativas de oxigênio (ROS). Mas estudos com linhagens de melanoma mostram que esse pigmento apresenta outras funções na célula, produzindo ROS quando irradiado com radiação ultravioleta (UV) e durante a sua síntese. O estímulo melanogênico mostrou-se ainda capaz de induzir a entrada em G0, estado conhecido como quiescência, que é caracterizado pela parada reversível na proliferação celular, geralmente desencadeado por falta de nutrientes, hipóxia ou ação de xenobióticos. Nesse estado, a célula diminui suas taxas metabólicas e de proliferação, ativando vias catabólicas, como as vias autofágicas, a fim de obter nutrientes e/ou eliminar organelas através da degradação seletiva via lisossomo. A melanogênese também alterou o perfil de expressão de diversas proteínas e os níveis de ADP/ATP na célula. Sabe-se que a mitocôndria é responsável pela produção da maior parte do ATP celular e que mudanças em seu funcionamento podem levar a alterações no metabolismo, aumento de ROS, parada do ciclo celular e até mesmo desencadear mecanismos de morte. Tendo em vista os efeitos do estímulo melanogênico utilizando L-tirosina e cloreto de amônio sobre células de melanoma murino B16-F10, esse estudo tem como objetivo investigar, nessas células, processos celulares que possam estar envolvidos na indução ao estado quiescente mediado por 48 horas de estímulo melanogênico, analisando principalmente os efeitos sobre parâmetros mitocondriais e autofágicos. Para isso, as células foram estimuladas com 0,4 mM L-tirosina e 10 mM NH4Cl durante 24 e 48 horas. A viabilidade celular foi observada através dos métodos do MTT e Cristal Violeta, já a indução do processo autofágico foi avaliada através de western blotting de marcadores específicos como LC3 e Beclin-1. A respiração celular foi avaliada por respirometria de alta resolução na presença de diferentes inibidores e desacopladores da cadeia respiratória mitocondrial; o potencial de membrana mitocondrial (??m) também foi avaliado, utilizando- se a sonda fluorescente JC-1 e por fim, o número de mitocôndrias, após o estímulo na síntese de melanina, foi estimado através da marcação mitocondrial com Mitotracker Green FM. Nossos resultados mostraram que o estímulo melanogênico foi capaz de inibir o crescimento das células de melanoma, promovendo uma diminuição no consumo de oxigênio após 48 horas de incubação. Esse estímulo ainda promoveu aumento nos níveis autofágicos, sem induzir a degradação seletiva da mitocôndria. Em relação ao colapso do potencial de membrana mitocondrial, não foram observadas diferenças significativas entre o grupo controle e as células B16-F10 após 24 ou 48 horas de estímulo da melanogênese. Essas observações apontam o provável envolvimento da mitocôndria sobre a indução da quiescência promovida pelo estímulo melanogênico e ainda nos dão subsídios para sugerir uma possível inibição promovida pela síntese de melanina ou pela ação de algum intermediário dessa reação sobre um dos complexos da cadeia transportadora de elétrons, mas estudos mais aprofundados necessitam ser realizados para confirmar essa hipótese. Palavras- chave: Melanina. Consumo de oxigênio. Autofagia. Mitofagia. | - |
| Descrição: dc.description | Abstract: Melanoma is among the most rare and aggressive tumors affecting the skin. Due to its high aggressiveness and its great power of metastasis, survival of patients diagnosed late is quite low. A major reason for the difficulty in treating this type of tumor is the presence of melanin, a pigment that gives color to skin, eyes and hair. The main function of melanin is to protect skin cells from damage caused by solar radiation, through the absorption of this radiation and quenching of reactive oxygen species (ROS). However, studies on melanoma cell lines show that the pigment has other functions in the cell, it produces ROS when irradiated with ultraviolet (UV) radiation and during its synthesis. Under melanogenesis stimulation, cells were able to entry into G0, known as quiescent state, which is characterized by reversible cell proliferation arrest, usually triggered by a lack of nutrients or hypoxia action of xenobiotics. In this state, cells decrease proliferation and their metabolic rates, enabling catabolic pathways such as the autophagic pathways to obtain nutrients or organelles removing by selective degradation via lysosome. The melanogenesis may also change the profile of various protein expression and ADP/ATP levels in the cell. It is known that mitochondria are responsible for producing most of the cellular ATP and changes in their operation can lead to changes in metabolism, increased ROS, cell cycle arrest and even triggering of mechanisms of death. In view of the effects of stimulus of melanogenesis using L-tyrosine and ammonium chloride on murine melanoma B16-F10, this study aims to investigate, in these cells, cellular processes that may be involved in the quiescent state induced after 48 hours of stimulus of melanogenesis, mainly analyzing the effects on mitochondrial and autophagic parameters. For this proposal, cells were stimulated with 0.4 mM L-tyrosine and 10 mM NH4Cl for 24 to 48 hours. Cell viability was observed by MTT and crystal violet methods, induction of autophagic process was assessed by Western blotting by specific markers LC3 and beclin-1. Cellular respiration was assessed by respirometry of high resolution in the presence of different inhibitors and uncouplers of mitochondrial respiratory chain. The mitochondrial membrane potential (??m) was also evaluated, using the fluorescent probe JC-1 and finally the number of mitochondria after stimulation in melanin synthesis was estimated using mitochondrial staining with Mitotracker Green FM. Our results showed that melanogenesis stimulation was able to inhibit the growth of melanoma cells and to promote a decrease in oxygen consumption after 48 hours of incubation. This stimulation also promoted increase in autophagic levels without inducing selective degradation of mitochondria. In relation to the collapse of mitochondrial membrane potential, no significant differences were observed between the control group and the B16-F10 cells after 24 or 48 hours of stimulation of melanogenesis. These observations point to the likely involvement of mitochondria on the induction of quiescence promoted by melanogenic stimulus and still give subsidies to suggest a possible inhibition promoted by melanin synthesis or by the action of some intermediate of this reaction on some complex of the electron transport chain, but further studies need to be conducted to confirm this hypothesis. Key words: Melanin. Oxygen consumption. Autophagy. Mitophagy. | - |
| Formato: dc.format | 71f. : il. algumas color., tabs., grafs. | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Relação: dc.relation | Disponível em formato digital | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Bioquímica | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Melanoma | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Melanina | - |
| Título: dc.title | Influência da melanogênese sobre funções mitocondriais e autofagia em células de melanoma murino B16-F10 | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo | |
Não existem arquivos associados a este item.
O Portal eduCAPES é oferecido ao usuário, condicionado à aceitação dos termos, condições e avisos contidos aqui e sem modificações. A CAPES poderá modificar o conteúdo ou formato deste site ou acabar com a sua operação ou suas ferramentas a seu critério único e sem aviso prévio. Ao acessar este portal, você, usuário pessoa física ou jurídica, se declara compreender e aceitar as condições aqui estabelecidas, da seguinte forma:
- O Termo de Uso pode ser modificado pela CAPES a qualquer tempo, sem necessidade de notificação prévia, sendo que tais modificações serão válidas a partir da data de sua veiculação neste portal;
- Para aprovação de cadastro do usuário ao sistema, a CAPES pode requisitar o fornecimento de informações, haja vista a política de segurança adotada, objetivando resguardar a segurança dos usuários nesse ambiente virtual;
- O usuário aceita e declara compreender que, em razão do peculiar ambiente da Internet, a CAPES não poderá garantir que o acesso ao site seja livre de erros ou problemas decorrentes de casos fortuitos, internos ou externos, casos de força maior ou ainda de outros casos não inteiramente sujeitos a controle direto dos administradores do site e, portanto o usuário se obriga a isentar a CAPES de quaisquer reclamações ou indenizações. A CAPES também não se responsabiliza por interrupções, interceptações, invasões, disseminação de vírus ou outros atos ilícitos, típicos e atípicos de ambiente virtual, e de web, dos quais a CAPES não tenha tido intenção deliberada de participar ou praticar;
- O usuário aceita e declara compreender que qualquer texto, marca, áudio, imagem, ou conteúdo veiculados no site são protegidos por direitos de propriedade intelectual o qual deve ser respeitado de acordo com a licença concedida pelo respectivo detentor dos referidos direitos, sob pena de apuração das responsabilidades cabíveis;
-
Desta forma a CAPES se exime de toda e qualquer responsabilidade por eventuais perdas, danos e prejuízos de qualquer natureza decorrentes:
- Do descumprimento da lei, da moral e dos bons costumes, como consequência da transmissão, difusão, armazenamento, disponibilização, recepção, obtenção ou acesso aos conteúdos;
- Da infração aos direitos de propriedade intelectual e industrial, segredos empresariais, compromissos contratuais de qualquer tipo, direitos à honra, à intimidade pessoal e familiar, à imagem das pessoas, direitos de propriedade e de toda e qualquer natureza pertencentes a um terceiro por consequência da transmissão, difusão, armazenamento, disponibilização, recepção, obtenção ou acesso aos conteúdos;
- Da falta de veracidade, precisão, exatidão, pertinência e/ou atualidade dos conteúdos;
- Da inadequação para qual seja o propósito, ou da frustração, das expectativas geradas pelos conteúdos;
- Exceto quando mencionado explicitamente, ou quando se tratar de citação de material alheio ou ilustração, nos limites estabelecidos pela Lei 9.610/98, todo o Conteúdo textual original do Portal eduCAPES está disponível livremente para leitura, entre outros direitos, conforme definido na licença Creative Commons;
- A CAPES não se responsabiliza pelos comentários, opiniões, informações, depoimentos, mensagens, vídeos, textos, imagens, áudios ou qualquer outro tipo de conteúdo que sejam, postados, publicados e disponibilizados através do Portal eduCAPES pelos usuários, sendo a responsabilidade civil e criminal atribuída única e exclusivamente ao autor dos comentários, opiniões, informações, ou mensagens. Todo o conteúdo publicado por usuários são de responsabilidade exclusiva dos mesmos e de caráter completamente independente, sendo que todo e qualquer tipo de opinião, ideal e/ou posição expressados não refletem necessariamente o ponto de vista e a posição do Portal eduCAPES e/ou da CAPES. A CAPES se reserva o direito de armazenar as informações destes autores e/ou Usuários, a fim de viabilizar sua identificação;
- O usuário aceita e declara compreender que a CAPES poderá disponibilizar no Portal eduCAPES, links de acesso para outros sites e endereços virtuais administrados, controlados ou operados por terceiros. Qualquer site conectado a partir do eduCAPES não está sob o controle da CAPES;
- A CAPES não assume nenhuma responsabilidade ou obrigação por qualquer informação, comunicação ou material encontrado em tais sites, ou em qualquer site conectado a tais sites. A CAPES não assume qualquer responsabilidade pelos serviços ou funcionalidades ali dispostos, sendo a decisão de utilização e a forma de relacionamento com os mesmos de exclusiva responsabilidade do usuário, que inclusive isenta a CAPES de fiscalizar o conteúdo ou zelar pela integridade de tais sites ou endereços virtuais.
- O usuário aceita e declara compreender que o acesso a determinadas áreas do site será restrito. Para acessá-las, o usuário deverá fazer o login e cadastrar uma senha de acesso. A senha é individual, sigilosa e intransferível, sendo o usuário o único responsável pela guarda da mesma. O usuário assume toda e qualquer responsabilidade pelo mau uso ou pela utilização da senha por terceiros;
- A CAPES reserva o direito de excluir o cadastro, de excluir o material submetido ou proibir o acesso do usuário ao portal eduCAPES no caso de qualquer abuso ou indício de prática ilícita no uso do site ou de qualquer uso não autorizado ou proibido pelo usuário, nos termos da legislação brasileira;
- As condições estabelecidas no Termo de Aceite e Uso do Site são regidas pela lei brasileira. Sob nenhuma circunstância o usuário deverá violar qualquer lei usando o portal eduCAPES para propósitos que incluam, mas não limitados a isso, difamação ou perturbação de outros, violação de direitos de propriedade intelectual ou de terceiros, envio de material obsceno ou ofensivo, vírus, arquivos corrompidos, ou outros programas que poderiam danificar ou alterar este site ou os computadores de empresa ou de terceiros;
- A CAPES reserva o direito de retirar qualquer conteúdo que infrinja a lei, a moral e os bons costumes nos termos da legislação vigente e também na hipótese de o conteúdo não se coadunar com as finalidades educativas do Portal. A CAPES garante o direito de defesa e contraditório dos usuários. O usuário reconhece que o material enviado por terceiros, que não a CAPES, não é endossado pela mesma.
Concordo e desejo baixar o arquivo
Não concordo e não irei baixar o arquivo
Não concordo e não irei baixar o arquivo