Purificação e propriedades da gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase de músculo de Anas sp (pato)

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Autor(es): dc.contributorNakano, Momoyo Sato-
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)-
Autor(es): dc.creatorBarbosa, Valma Martins-
Data de aceite: dc.date.accessioned2020-01-31T13:03:37Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2020-01-31T13:03:37Z-
Data de envio: dc.date.issued2019-12-09-
Data de envio: dc.date.issued2019-12-09-
Data de envio: dc.date.issued1985-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/64699-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/64699-
Descrição: dc.descriptionOrientadora: Dra. Momoyo Sato Nakano-
Descrição: dc.descriptionDissertação (mestrado) -Universidade Federal do Paraná, Curso de Pós-Graduação em Bioquímica-
Descrição: dc.descriptionInclui referências: p. 50-57-
Descrição: dc.descriptionResumo: A gliceraldeido-3-fosfato desidrogenase (EC 1.2.1.12) de musculo de Anas sp (pato) foi purificada pelo método de Cori et a l (15), com algumas modificações. A enzima foi demonstrada ser pura por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença e ausência de SDS e por eletroforese de zona em fitas de poliacetato de celulose. O peso molecular foi estimado em 140.000 para a enzima nativa e 36.000 para os monômeros. O pH ótimo encontrado foi de 8,2. Os valores de Km foram determinados para o gliceraldeido-3-fosfato e para o NAD sendo em torno de 240 yM e 80 yM, respectivamente. Foi demonstrado que o NADH é um inibidor competitivo em relação ao NAD, sendo o Ki de 17 yM. A adição de metais [2.10-3M] como Mg++ , Mn++ e Ca++ não alteraram significativamente a atividade de GPDH, enquanto Hg++, Cu++ e Zn++ inibiram totalmente a enzima. A titulação de grupos-SH com Nbs2 indicou 12,7 grupos-SH por mol de enzima mas apenas 4 são essencialmente reativos por tetrâmero de enzima. Dos reagentes sulfidrilas testados, o p-hidroxi-mercuribenzoato e o p-cloromercuribenzoato demonstraram ser potentes inibidores, mas a inibição foi totalmente revertida com a adição subsequente de excesso de 2-mercaptoetanol. A validade dos dados cinéticos foi analisada através de programas em linguagem BASIC.-
Formato: dc.format57 f. : il., grafs., tabs.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
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Relação: dc.relationDisponível em formato digital-
Palavras-chave: dc.subjectBioquímica-
Título: dc.titlePurificação e propriedades da gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase de músculo de Anas sp (pato)-
Tipo de arquivo: dc.typelivro digital-
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