Atividade biomoduladora in vitro e in vivo de pectina extraída de talos do brócolis (Brassica oleracea var. italica)

Registro completo de metadados
MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorNoleto, Guilhermina Rodrigues, 1966--
Autor(es): dc.contributorPetkowicz, Carmen Lúcia de Oliveira-
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica)-
Autor(es): dc.creatorBusato, Bianca, 1990--
Data de aceite: dc.date.accessioned2020-01-31T13:00:53Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2020-01-31T13:00:53Z-
Data de envio: dc.date.issued2019-10-11-
Data de envio: dc.date.issued2019-10-11-
Data de envio: dc.date.issued2018-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/63725-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/63725-
Descrição: dc.descriptionOrientadora: Profa. Dra. Guilhermina Rodrigues Noleto-
Descrição: dc.descriptionCoorientadora: Profa. Dra. Carmen Lucia de Oliveira Petkowicz-
Descrição: dc.descriptionDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências – Bioquímica. Defesa : Curitiba, 03/07/2018-
Descrição: dc.descriptionInclui referências: p.64-71-
Descrição: dc.descriptionResumo: Vários estudos tem demonstrado os efeitos imunomoduladores e antitumorais de pectinas, com destaque para as pectinas modificadas (MP), cuja atividade biológica e favorecida pela modificação estrutural. A pectina extraída de Brassica oleracea var. italica (FB) apresenta baixo peso molecular e galactose como o principal açúcar neutro, características que podem torna-la mais facilmente absorvida pelo sistema gastrointestinal, acessando assim a circulação sanguínea e levando a respostas biomoduladoras. No presente estudo, FB foi avaliada quanto a sua atividade imunomoduladora e citotóxica para células de hepatocarcinoma humano (HepG2). FB (750 ?g/ml) reduziu a viabilidade de macrofagos peritoneais de camundongos em ~28% com 48h de incubação. A atividade fagocitica destas células apos incubação por 48h com FB (500 ?g/ml) aumentou em 30% e 35% nos ensaios com leveduras e com vermelho neutro, respectivamente. O numero de macrófagos ativados avaliados por analise morfológica apos incubação com FB 250 ?g/ml e 500 ?g/ml aumentou em 40% e 68%, respectivamente. Adicionalmente, aumento de 120% no numero de macrófagos peritoneais ativados foi observado em camundongos apos 5 dias de administração oral (200 mg/kg) da pectina. FB (200 mg/kg) injetada na cavidade peritoneal induziu o recrutamento de células para este local apos 24 horas, alcançando ~ 490% e um aumento de 251% no numero destas células com perfil ativado em relação ao controle. No sobrenadante de macrófagos de animais (normais) incubados durante 48 h com FB (250 e 500?g/ml) e no fluido peritoneal de camundongos tratados com a pectina (200 mg/kg por 5 dias) não houve aumento na produção de oxido nítrico e interleucinas IL-1? e IL-12 em relação ao controle, avaliados pelos métodos de Griess e ELISA, respectivamente. Entretanto, apos tratamento in vivo, houve aumento na produção de IL-10 por estas células. A proliferação de linfócitos totais isolados de baco de camundongos tratados oralmente com FB (200mg/kg) por 5 dias chegou a 51% em relação ao controle sem tratamento. Ao serem plaqueados e incubados com concanavalina A (ConA) por 72h, houve um aumento de 24,4% no numero de células em relação ao controle. O sobrenadante da cultura de linfócito de camundongos tratados oralmente com FB estimulou a proliferação de células da medula óssea, representando um aumento de 46,1% no numero de células em comparação com o grupo controle. Este resultado indica que FB foi capaz de promover proliferação celular mediada por linfócitos. Adicionalmente, FB reduziu a viabilidade de células HepG2 apos incubação com diferentes concentrações por 48 e 72 horas. Ensaio preliminar para apoptose mostrou que incubação de HepG2 com FB a 250 e 500 ?g/ml por 48 horas resultou em aumento na proporção de células fixadas com anexina V e PI em comparação com os controles não tratados. Estes resultados sugerem que FB administrada oralmente pode levar a respostas antiinflamatórias e antitumorais. Palavras-chave: Brassica oleracea var. italica. Pectina. Imunomodulação. Macrófagos. Linfócitos.-
Descrição: dc.descriptionAbstract: Many studies have been reported the immunomodulatory and antitumor effects of pectins, highlighting modified pectins (MPs), whose biological activity is favored by structural modification. Pectin extracted from Brassica oleracea var. italica (FB) presents low molecular mass and galactose as the main neutral sugar, which could be more easily absorbed by the microfold cells in the gastrointestinal tract, access the blood and trigger biomodulatory responses. In the present study, FB was evaluated for its immunomodulatory activity and cytotoxicity to hepatocellular carcinoma cells (HepG2). FB (750 ?g/ml) reduced the viability of peritoneal macrophages of mice by ~ 28% after 48h of incubation. In the same conditions, FB (500 ?g/ml) increased the phagocytic activity of macrophages by 30% e 35% in the assays with yeast as phagocytic particles and neutral red, respectively. Morphological analysis revealed an increase of 40% and 68% in the number of activated macrophages in the presence of FB 250 ?g/ml and 500 ?g/ml, respectively. FB (200 mg/kg) by oral administration enhanced 120% the number of activated macrophages after 5 days of treatment. When the same dose was injected intraperitoneally, an increase of 490% in the peritoneum cell number was observed. The analysis of these cells revealed an increase of 251% in the number of cells with activated profile, in respect to control. In the supernatant of macrophages from normal mice incubated with FB (250 and 500?g/ml) for 48h, and in the peritoneal fluid from mice after treatment with FB (200mg/kg), no alterations were detected in the nitric oxide and interleukins (IL-1? and IL- 12) production, in respect to control. However, after in vivo treatment, an increase in IL-10 production by these cells was observed. The proliferation of spleen lymphocytes from mice orally treated with FB (200mg/kg) for 5 days reached 51% in respect to control. These cells were then plated in the presence of concanavalin A for 72 h, and an increase of 24,4% in the cell number was observed. The supernatant of lymphocytes from mice orally treated with FB (200mg/kg) promoted the proliferation of bone marrow cells, representing an increase of 46.1% in respect to control (untreated). This result suggests that FB was able to stimulate the lymphocyte-mediated bone marrow cell proliferation. A preliminary assay for apoptosis showed that HepG2 cells incubated with FB at 250 and 500 ?g/ml for 48 h had an increase in the proportion of annexin V/PI-staining cells in comparison with untreated controls. These findings showed that oral administration of FB might trigger anti-inflammatory and antitumoral responses. Keywords: Brassica oleracea var. italica. Pectin. Immunomodulation. Macrophages. Lymphocytes.-
Formato: dc.format71 p. : il.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Palavras-chave: dc.subjectPectina-
Palavras-chave: dc.subjectBioquímica-
Palavras-chave: dc.subjectBrassica-
Palavras-chave: dc.subjectImunomodulação-
Palavras-chave: dc.subjectMacrofagos-
Palavras-chave: dc.subjectLinfocitos-
Palavras-chave: dc.subjectFígado - Cancer-
Título: dc.titleAtividade biomoduladora in vitro e in vivo de pectina extraída de talos do brócolis (Brassica oleracea var. italica)-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo

Não existem arquivos associados a este item.