Avaliação do
Você é humano?
8
5
=
Denunciar conteúdo impróprio
Atenção: Todas as denúncias são sigilosas e sua identidade será preservada.
Os campos nome e e-mail são de preenchimento opcional
Engenharia de anticorpos aplicada ao estudo e neutralização de componentes presentes no veneno de Loxosceles sp
Use este link compartilhar ou citar este material: http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/63711
Registro completo de metadados
| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Alvarenga, Larissa Magalhães | - |
| Autor(es): dc.contributor | Finco, Alessandra Becker | - |
| Autor(es): dc.contributor | Moura, Juliana Ferreira de | - |
| Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Tecnologia. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia | - |
| Autor(es): dc.creator | Mondini, Camila Alves, 1993- | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2020-01-31T13:00:55Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2020-01-31T13:00:55Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2019-10-10 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2019-10-10 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2018 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/1884/63711 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/63711 | - |
| Descrição: dc.description | Orientadora: Prof.ª(a). Dr(a). Larissa Magalhães Alvarenga | - |
| Descrição: dc.description | Coorientadoras: Prof.ª(A). Dr(a). Alessandra Becker Finco e Prof.ª(A). Dr(A). Juliana Ferreira de Moura | - |
| Descrição: dc.description | Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa : Curitiba, 26/03/2018 | - |
| Descrição: dc.description | Inclui referências: p.73-80 | - |
| Descrição: dc.description | Resumo: No Brasil, o gênero Loxosceles é responsável por causar acidentes em humanos, predominantemente as espécies Loxosceles intermedia, Loxosceles gaucho e Loxosceles laeta. Os acidentes ocorrem com maior frequência durante as épocas mais quentes do ano. Em 2015 foram registrados 7.370 casos no Brasil, o que torna o envenenamento por aranhas Loxosceles um sério problema de saúde no país. O conhecimento do conteúdo completo do veneno de Loxosceles ainda está sob investigação. No entanto, sabe-se que sua composição bioquímica é uma mistura complexa de compostos biologicamente ativos, principalmente proteínas e peptídeos com ação tóxica e/ou enzimática. As notinas são as proteínas mais abundantes no veneno, sendo componentes fundamentais nos mecanismos de captura de presas para alimentação. Sabe-se que são encarregadas de paralisar presas, em especial insetos. No entanto seu papel em organismos humanos ainda não está elucidado. Visto que as notinas representam uma grande porcentagem da composição do veneno, torna-se imprescindível o entendimento da sua função no envenenamento. Na maioria das espécies de Loxosceles prevalece as toxinas que diretamente desencadeiam os principais sinais e sintomas decorrentes da picada deste aracnídeo. Também conhecidas como toxinas dermonecróticas, as fosfolipases-D causam os principais efeitos nocivos atribuídos ao veneno total, tendo destaque a dermonecrose, edema e hemólise. Loxoscelismo descreve a condição comumente manifestada após acidentes com aranhas marrons. O diagnóstico é geralmente definido com base na evolução do quadro clínico do paciente e aspectos epidemiológicos. Entretanto, há outras patologias que podem causar o desenvolvimento de lesão dermonecrótica; sendo assim, a confirmação do diagnóstico auxilia no empregado do tratamento apropriado. A soroterapia é o único tratamento especifico, porém efeitos adversos são um problema iminente. Dessa forma se torna necessário a obtenção de uma ferramenta capaz de detectar e neutralizar componentes do veneno. Anticorpos são bons candidatos por poderem ser selecionados de acordo com sua reatividade para uma proteína específica. À vista disso, neste projeto, realizou-se a produção e caracterização de um anticorpo monoclonal murino - mAb12 - e seus fragmentos recombinantes - scFv12P e diabody12P. O mab12 assim como os fragmentos recombinantes foram capazes de reconhecer componentes presentes nos venenos das aranhas L. intermedia, L. gaucho e L. laeta, apresentando reatividade as proteínas de baixa massa (5-10kDa). Na literatura há descrito dois anticorpos monoclonais direcionados as fosfolipases dos venenos loxoscélicos: LimAb7 e Lid1mAb16, sendo assim um alvo diferente ao do mAb12. Também foi verificado o potencial protetor do mAb12 através de ensaios de hemólise in vitro, sendo observado inibição da hemólise com 320 pmol do anticorpo. Tal comportamento pode ser possivelmente devido a reação cruzada com as esfingomielinases ou sinergismo entre alvo antigênico e toxinas dermonecróticas. Em ELISA de competição, o scFv12P foi capaz de detectar pequenas concentrações do veneno em solução, possuindo potencial aplicação como ferramenta de identificação dos três venenos. Com base nas análises de imunoprecipitação e espectrometria de massa foi sugerido o alvo antigênico, uma notina que possui 100% de identidade entre as espécies de L. intermedia e L. gaucho e alta similaridade (>80%) com L. laeta. O estudo da função dessa classe de proteína no organismo humano auxiliaria a possível identificação da sua atividade no envenenamento. Palavras-chave: Loxosceles, anticorpo monoclonal, fragmento de anticorpo recombinante, notina, reação cruzada, sinergismo, esfingomielinase. | - |
| Descrição: dc.description | Abstract: In Brazil, the Loxosceles genus of arachnid is responsible for numerous cases of significant harm to humans. The Loxosceles intermedia, Loxosceles gaucho and Loxosceles laeta species are most hazardous. Spider bites occur more frequently during the hottest times of the year. In 2015 7,370 cases were registered in Brazil, making spider poisoning a serious health concern for the country. The exact content of Loxosceles venom is still being investigated. However, its biochemical composition is known to be a complex mixture of biologically active compounds, mainly proteins and peptides with toxic and/or enzymatic action. Notines are the most abundant proteins in the venom and are fundamental components in the mechanisms of capture of prey for feeding. They paralyse prey in certain insects. However, its effect on human organisms is unknown. Since they represent a large percentage of the composition of the poison, it becomes essential to understand its role in poisoning. Toxins that trigger the main signs and symptoms resulting from this arachnid bite are prevalent in most Loxosceles species. Phospholipases-D, also known as dermonecrotic toxins, cause the most severe effects attributed to the venom, such as dermonecrosis, edema and hemolysis. Loxoscelism describes the condition commonly manifested after a brown spider bite. The diagnosis is based on the evolution of the patient's clinical and epidemiological conditions. However, other pathologies can cause the development of a dermonecrotic lesion; so, a confirmation of the diagnosis enables appropriate treatment. Serum therapy is the only specific treatment and there are various adverse effects. In this way, it becomes necessary to obtain a tool capable of detecting and neutralising components of the venom Antibodies are good candidates because they can be selected for a specific protein. Therefore, in this project, a production and characterisation of a murine monoclonal antibody - mAb12 - and its recombinant fragments - scFv12P and diabody12P is performed. mab12 as well its recombinant fragments were able to recognize components present L. intermedia, L. gaucho and L. laeta spider venoms, presenting reactivity to low-mass proteins (5-10kDa). In the literature, two monoclonal antibodies directed to phospholipases of Loxosceles venoms have been described: LimAb7 and Lid1mAb16, thus being a different target than mAb12. The protective potential of mAb12 has also been verified by in vitro hemolysis assay, with inhibition of haemolysis observed with 320 pmol/mL of antibody. Such behaviour may possibly be due to cross-reacting with the sphingomyelinases or synergism between antigenic target and dermonecrotic toxins. In competitive ELISA, scFv12P was able to detect small concentrations of venom in solution, presenting its potential application as a tool of venom identification, with potential application as a tool to identify the three venoms. Based on the analysis of immunoprecipitation and mass spectrometry, the antigenic target suggested was a notine that has 100% identity between L. intermedia and L. gaucho species and high similarity (> 80%) to L. laeta. The study of this protein class function in the human organism would help the possible identification of its activity in the poisoning. Key-words: Loxosceles, monoclonal antibody, recombinant antibody fragment, notine, cross-reaction, , synergism, sphingomyelinase. | - |
| Formato: dc.format | 80 p. : il. (algumas color.). | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Soroterapia | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Anticorpos monoclonais | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Aranha - Veneno | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Teses | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Tecnologia Química | - |
| Título: dc.title | Engenharia de anticorpos aplicada ao estudo e neutralização de componentes presentes no veneno de Loxosceles sp | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo | |
Não existem arquivos associados a este item.
O Portal eduCAPES é oferecido ao usuário, condicionado à aceitação dos termos, condições e avisos contidos aqui e sem modificações. A CAPES poderá modificar o conteúdo ou formato deste site ou acabar com a sua operação ou suas ferramentas a seu critério único e sem aviso prévio. Ao acessar este portal, você, usuário pessoa física ou jurídica, se declara compreender e aceitar as condições aqui estabelecidas, da seguinte forma:
- O Termo de Uso pode ser modificado pela CAPES a qualquer tempo, sem necessidade de notificação prévia, sendo que tais modificações serão válidas a partir da data de sua veiculação neste portal;
- Para aprovação de cadastro do usuário ao sistema, a CAPES pode requisitar o fornecimento de informações, haja vista a política de segurança adotada, objetivando resguardar a segurança dos usuários nesse ambiente virtual;
- O usuário aceita e declara compreender que, em razão do peculiar ambiente da Internet, a CAPES não poderá garantir que o acesso ao site seja livre de erros ou problemas decorrentes de casos fortuitos, internos ou externos, casos de força maior ou ainda de outros casos não inteiramente sujeitos a controle direto dos administradores do site e, portanto o usuário se obriga a isentar a CAPES de quaisquer reclamações ou indenizações. A CAPES também não se responsabiliza por interrupções, interceptações, invasões, disseminação de vírus ou outros atos ilícitos, típicos e atípicos de ambiente virtual, e de web, dos quais a CAPES não tenha tido intenção deliberada de participar ou praticar;
- O usuário aceita e declara compreender que qualquer texto, marca, áudio, imagem, ou conteúdo veiculados no site são protegidos por direitos de propriedade intelectual o qual deve ser respeitado de acordo com a licença concedida pelo respectivo detentor dos referidos direitos, sob pena de apuração das responsabilidades cabíveis;
-
Desta forma a CAPES se exime de toda e qualquer responsabilidade por eventuais perdas, danos e prejuízos de qualquer natureza decorrentes:
- Do descumprimento da lei, da moral e dos bons costumes, como consequência da transmissão, difusão, armazenamento, disponibilização, recepção, obtenção ou acesso aos conteúdos;
- Da infração aos direitos de propriedade intelectual e industrial, segredos empresariais, compromissos contratuais de qualquer tipo, direitos à honra, à intimidade pessoal e familiar, à imagem das pessoas, direitos de propriedade e de toda e qualquer natureza pertencentes a um terceiro por consequência da transmissão, difusão, armazenamento, disponibilização, recepção, obtenção ou acesso aos conteúdos;
- Da falta de veracidade, precisão, exatidão, pertinência e/ou atualidade dos conteúdos;
- Da inadequação para qual seja o propósito, ou da frustração, das expectativas geradas pelos conteúdos;
- Exceto quando mencionado explicitamente, ou quando se tratar de citação de material alheio ou ilustração, nos limites estabelecidos pela Lei 9.610/98, todo o Conteúdo textual original do Portal eduCAPES está disponível livremente para leitura, entre outros direitos, conforme definido na licença Creative Commons;
- A CAPES não se responsabiliza pelos comentários, opiniões, informações, depoimentos, mensagens, vídeos, textos, imagens, áudios ou qualquer outro tipo de conteúdo que sejam, postados, publicados e disponibilizados através do Portal eduCAPES pelos usuários, sendo a responsabilidade civil e criminal atribuída única e exclusivamente ao autor dos comentários, opiniões, informações, ou mensagens. Todo o conteúdo publicado por usuários são de responsabilidade exclusiva dos mesmos e de caráter completamente independente, sendo que todo e qualquer tipo de opinião, ideal e/ou posição expressados não refletem necessariamente o ponto de vista e a posição do Portal eduCAPES e/ou da CAPES. A CAPES se reserva o direito de armazenar as informações destes autores e/ou Usuários, a fim de viabilizar sua identificação;
- O usuário aceita e declara compreender que a CAPES poderá disponibilizar no Portal eduCAPES, links de acesso para outros sites e endereços virtuais administrados, controlados ou operados por terceiros. Qualquer site conectado a partir do eduCAPES não está sob o controle da CAPES;
- A CAPES não assume nenhuma responsabilidade ou obrigação por qualquer informação, comunicação ou material encontrado em tais sites, ou em qualquer site conectado a tais sites. A CAPES não assume qualquer responsabilidade pelos serviços ou funcionalidades ali dispostos, sendo a decisão de utilização e a forma de relacionamento com os mesmos de exclusiva responsabilidade do usuário, que inclusive isenta a CAPES de fiscalizar o conteúdo ou zelar pela integridade de tais sites ou endereços virtuais.
- O usuário aceita e declara compreender que o acesso a determinadas áreas do site será restrito. Para acessá-las, o usuário deverá fazer o login e cadastrar uma senha de acesso. A senha é individual, sigilosa e intransferível, sendo o usuário o único responsável pela guarda da mesma. O usuário assume toda e qualquer responsabilidade pelo mau uso ou pela utilização da senha por terceiros;
- A CAPES reserva o direito de excluir o cadastro, de excluir o material submetido ou proibir o acesso do usuário ao portal eduCAPES no caso de qualquer abuso ou indício de prática ilícita no uso do site ou de qualquer uso não autorizado ou proibido pelo usuário, nos termos da legislação brasileira;
- As condições estabelecidas no Termo de Aceite e Uso do Site são regidas pela lei brasileira. Sob nenhuma circunstância o usuário deverá violar qualquer lei usando o portal eduCAPES para propósitos que incluam, mas não limitados a isso, difamação ou perturbação de outros, violação de direitos de propriedade intelectual ou de terceiros, envio de material obsceno ou ofensivo, vírus, arquivos corrompidos, ou outros programas que poderiam danificar ou alterar este site ou os computadores de empresa ou de terceiros;
- A CAPES reserva o direito de retirar qualquer conteúdo que infrinja a lei, a moral e os bons costumes nos termos da legislação vigente e também na hipótese de o conteúdo não se coadunar com as finalidades educativas do Portal. A CAPES garante o direito de defesa e contraditório dos usuários. O usuário reconhece que o material enviado por terceiros, que não a CAPES, não é endossado pela mesma.
Concordo e desejo baixar o arquivo
Não concordo e não irei baixar o arquivo
Não concordo e não irei baixar o arquivo