Profilaxia da transmissão do Neospora caninum pelo sêmen de touros

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Autor(es): dc.contributorWeiss, Romildo Romualdo, 1946--
Autor(es): dc.contributorSoccol, Vanete Thomaz, 1954--
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Tecnologia. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia-
Autor(es): dc.creatorAbreu, Ana Claudia Machinski Rangel de-
Data de aceite: dc.date.accessioned2019-08-21T23:12:50Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2019-08-21T23:12:50Z-
Data de envio: dc.date.issued2018-11-23-
Data de envio: dc.date.issued2018-11-23-
Data de envio: dc.date.issued2018-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/56175-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/56175-
Descrição: dc.descriptionOrientador: Prof. Dr. Romildo Romualdo Weiss-
Descrição: dc.descriptionCoorientador: Prof.ª Dr.ª Vanete Tomaz Soccol-
Descrição: dc.descriptionDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Bioprocessos e Biotecnologia. Defesa : Curitiba, 29/03/2018-
Descrição: dc.descriptionInclui referências-
Descrição: dc.descriptionÁrea de concentração: Saúde Animal e Humana-
Descrição: dc.descriptionResumo: O conhecimento das vias de transmissão e do ciclo de vida do Neospora caninum é importante para a implementação de medidas de controle da doença. Como o DNA de N. caninum foi detectado no sêmen fresco e congelado de touros, estudos avaliaram a transmissão venérea do N. caninum em bovinos, classificandoa como via de transmissão horizontal. Por esse motivo, são necessárias medidas de precaução para o uso do sêmen de touros infectados com N. caninum. O presente trabalho é dividido em dois capítulos: o primeiro capítulo aborda uma revisão bibliográfica sobre Neosporose na espécie bovina e o segundo capítulo refere-se à condução dos experimentos 1 e 2 com o objetivo de desenvolver um diluente, para criopreservação de sêmen de touro, eficiente na profilaxia da transmissão venérea do N. caninum. O experimento 1 corresponde ao teste dos antimicrobianos - trimetoprim isolado (TRI) e associado à sulfadiazina (SDT) e à sulfametoxazol (SMT), claritromicina (CLA), eritromicina (ERI), azitromicina (AZI) e clindamicina (CLI) - o qual foi realizado utilizando cultivo celular inoculado com 104 taquizoítas de N. caninum que foi avaliado quanto à presença de taquizoítas livre e ao efeito citopático na monocamada por meio de microscópio invertido. Com os resultados obtidos a partir do teste dos princípios ativos e associações em cultivo celular, os antimicrobianos que se mostraram eficientes no controle dos taquizoítas in vitro foram utilizados no preparo do diluente para o sêmen. Cada meio diluidor foi avaliado quanto à toxicidade em relação às células espermáticas (experimento 2). O ejaculado bovino coletado foi dividido em 8 grupos, sendo que 7 grupos receberam um antibiótico no meio diluidor para criopreservação e 1 não recebeu (grupo controle). Foram realizadas análises de cinétina espermática em sistema automatizado (Computer Assisted Sperm Analysis - CASA), e reação acrossomal e potencial mitocondrial das amostras criopreservadas por citometria de fluxo. Os grupos não diferiram em relação ao grupo controle quanto aos parâmetros Amplitude de Deslocamento Lateral de Cauda (ALH), Retilinearidade (STR) e Linearidade (LIN). Os grupos SDT, SMT e AZI apresentaram menores valores (P<0,05) de Velocidade de Trajeto (VAP) em relação ao grupo controle. A Velocidade Progressiva (VSL) foi inferior nos grupos SMT e AZI (P<0,05) e a Frequencia de Batimentos de Cauda (BCF) também foi inferior nos grupos CLI e AZI (P<0,05). Os valores de Velocidade Curvilinear (VCL) dos grupos SDT, SMT e CLA apresentaramse menores que o grupo controle (P<0,05). Em relação à Motilidade Total (MT) e Motilidade Progressiva (MP), os grupos SMT, ERI e AZI apresentaram menores valores (P<0,05) quando comparados com o grupo controle. Da mesma forma, os grupos SMT e AZI apresentaram mais defeitos morfológicos. Quanto à citometria de fluxo, os grupos SDT, SMT e AZI apresentaram porcentagens significativamente maiores (P<0,05) de espermatozoides com reação acrossomal em relação ao grupo controle. E os grupos SDT, SMT e CLA apresentaram valores significativamente menores (P<0,05) de Alto Potencial Mitocondrial (HPM) quando comparados ao controle. Os antibióticos efetivos contra o N. caninum e que não foram deletérios aos espermatozoides, e por isso podem ser adicionados aos meios diluidores para criopreservação de sêmen de touros, foram a clindamicina, a claritromicina e o trimetorpim isolado. Palavras-chave: Neosporose. Bovinos. Sêmen. Antibiótico. Diluente.-
Descrição: dc.descriptionAbstract: The knowledge of the transmission pathways and life cycle of Neospora caninum is important for an implementation of disease control measures. As N. caninum DNA was detected in the fresh and frozen semen of bulls, preview studies evaluated the venereal transmission of N. caninum in cattle, classifying it as a horizontal transmission route. For this reason, preventive measures are required for the use of N. caninum infected bulls semen. The present study is divided into two chapters: the first chapter is about a literature review on Neosporosis in the bovine species and the second chapter refers to the conduction of experiments 1 and 2 with the objective of developing a diluent for cryopreservation of bull semen that is efficient in the prophylaxis of venereal transmission of N. caninum. The experiment 1 corresponds to the antimicrobial test - trimethoprim isolated (TRI) and associated with sulfadiazine (SDT) and sulfamethoxazole (SMT), clarithromycin (CLA), erythromycin (ERI), azithromycin (AZI) and clindamycin (CLI) - was carried out with cell culture inoculated with 104 tachyzoites of N. caninum which was evaluated for the presence of tachyzoites and the cytopathic effect in the monolayer using inverted microscope. With the results obtained from the test of the active principles and associations in cell culture, the antimicrobials that demonstrate effictive in controlling the tachyzoites in vitro, were used in the preparation of the diluent for semen. Each diluent medium were evaluated for toxicity to the sperm cells (experiment 2). The collected bovine ejaculate was divided into 8 groups, with 7 groups receiving an antibiotic in the diluent medium for cryopreservation and one not receiving (control group). Sperm kinetics in automated system (Computer Assisted Sperm Analysis - CASA), acrosomal reaction and mitochondrial potential performed in flow cytometry in cryopreserved samples. The groups did not differ in relation to the control group regarding the amplitude of lateral head displacement (ALH), straightness (STR) and linearity (LIN) parameters. The SDT, SMT and AZI groups presented lower values (P<0.05) of average path velocity (VAP) in relation to the control group. The straightline velocity (VSL) was lower in the SMT and AZI groups (P<0.05) and the beat/cross frequency (BCF) was also lower in the CLI and AZI groups (P<0.05). The curvilinear velocity (LCV) values of the SDT, SMT and CLA groups were lower than the control group (P<0.05). In relation to total motility (TM) and progressive motility (PM), the SMT, ERI and AZI groups had lower values (P<0.05) when compared to the control group. Similary, the SMT and AZI groups showed more morphological defects. As for flow cytometry, the SDT, SMT and AZI groups presented significantly higher (P<0.05) percentages of spermatozoa with reacted acrosome than the control group. And the SDT, SMT and CLA groups presented significantly lower values (P<0.05) of high potencial mitochondrial (HPM) when compared to the control group. The antibiotics effective against N. caninum and that were not deleterious to spermatozoa and therefore can be added to the diluent media for cryopreservation of bull semen were clindamycin, clarithromycin and trimethoprim. Key words: Neosporosis. Bovine. Semen. Antibiotic. Diluent.-
Formato: dc.format74 p. : il. (algumas color.), tabs.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Palavras-chave: dc.subjectAntibioticos-
Palavras-chave: dc.subjectBovino - Doenças-
Palavras-chave: dc.subjectReprodução animal-
Palavras-chave: dc.subjectTeses-
Palavras-chave: dc.subjectTecnologia Química-
Título: dc.titleProfilaxia da transmissão do Neospora caninum pelo sêmen de touros-
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