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Metadados | Descrição | Idioma |
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Autor(es): dc.contributor | Nakao, Lia Sumie | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | - |
Autor(es): dc.creator | Lo, Sze Mei, 1993- | - |
Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-09-01T11:49:41Z | - |
Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-09-01T11:49:41Z | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-09-16 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-09-16 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2015 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/1884/40565 | - |
Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/40565 | - |
Descrição: dc.description | Orientadora: Lia Sumie Nakao | - |
Descrição: dc.description | Monografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | - |
Descrição: dc.description | Resumo : Inicialmente descoberto pela função de indução à apoptose, o apoptosis-inducing factor (AIF) é uma proteína monomérica que se encontra fixada na membrana interna da mitocôndria. O AIF faz parte da classe das flavoproteínas, ou seja dependente do cofator FAD, especificamente para a função de NADH oxidoredutase. AIF, entretanto, é reconhecido como proteína envolvida na indução da apoptose. Quando ocorre o estímulo apoptótico, o AIF é clivado e é liberado para o citosol e posteriormente para o núcleo, onde promove fragmentação de DNA em larga escala, levando assim à morte celular. No entanto, estudos posteriores mostraram a importância do AIF na manutenção fisiológica do complexo I da cadeia transportadora de elétrons. E, além disso, foi mostrado que o AIF é capaz de se ligar à proteína tiorredoxina, através de pontes de dissulfeto, a qual pode estar relacionada com suas funções. Portanto, esse trabalho teve como objetivo principal a construção de vetores de expressão eucariótica do AIF1 humano, assim como mutantes de cada uma das cisteínas, que servirão como ferramentas para estudos das funções redox do AIF. A clonagem do gene AIF1 foi realizada a partir de um plasmídeo contendo o gene da AIF em um vetor comercialmente disponível. Uma etiqueta de hemaglutinina (HA) foi fundida na porção C-terminal, originando a proteína de fusão AIF-HA. A partir dessa construção a técnica de mutação sítio dirigida foi usada para produzir os três mutantes de cisteína para serina (C255S, C316S e C440S), impedindo a formação de pontes de dissulfeto. O sucesso da clonagem e das mutagêneses foram avaliadas através de sequenciamento de DNA e expressão dos vetores em células HEK293T, que confirmaram a integridade da sequência de interesse e a expressão correta do gene. Os resultados de expressão mostraram que o AIF selvagem é expressa em quantidades mais altas do que os AIFs mutados. Em conclusão, este trabalho resultou na produção e na caracterização de ferramentas que servirão para estudos posteriores da importância das cisteínas na função redox do AIF1. | - |
Formato: dc.format | 1 recurso online : PDF. | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Relação: dc.relation | Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader | - |
Palavras-chave: dc.subject | Apoptose | - |
Palavras-chave: dc.subject | Cisteína | - |
Título: dc.title | Construção de vetores de expressão eucariótica da proteína AlF1 (apoptosis-inducing factor 1 ) e seus mutantes de cisteína : ferramentas para investigar os papéis redox do AIF1 | - |
Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo |
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