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Metadados | Descrição | Idioma |
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Autor(es): dc.contributor | Soccol, Vanete Thomaz | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Tecnologia. Programa de Pós-Graduaçao em Processos Biotecnológicos | - |
Autor(es): dc.creator | Penha, Tânia Regina | - |
Data de aceite: dc.date.accessioned | 2019-08-21T23:48:51Z | - |
Data de disponibilização: dc.date.available | 2019-08-21T23:48:51Z | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2014-05-08 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2014-05-08 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2012 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | http://hdl.handle.net/1884/35041 | - |
Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/35041 | - |
Descrição: dc.description | Resumo: As infecções causadas por herpesvírus bovino tipos 1 (BoHV-1) e 5 (BoHV-5), membros da família Herpesviridae, têm sido associadas a apresentações clínicas e subclínicas nesta espécie animal. As similaridades genômica e antigênica entre ambos representam um grande desafio para o diagnóstico laboratorial destas infecções. Os objetivos do presente estudo foram inicialmente identificar duas cepas (A e B), isoladas de casos clínicos, pelas técnicas de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e Análise de Enzima de Restrição (REA) utilizando o gene da glicoproteína C (gC) e enzima BglI, respectivamente. Os amplicons obtidos para as referidas amostras apresentaram bandas em torno de 572 a 575 pb, respectivamente. Na REA, a amostra B apresentou dois fragmentos (333 pb e 239 pb) enquanto que a amostra A permaneceu com um único fragmento de aproximadamente 572 pb. O sequenciamento parcial dos genes da gC revelou 572 nucleotídeos para a amostra A compatível com o BoHV-1 do sub tipo 1.1. A amostra B indicou 575 nucleotídeos e foi agrupada com o BoHV-5. Na segunda etapa deste estudo a amostra B foi utilizada para produzir 61 hibridomas produtores de anticorpos monoclonais (AcMc) anti-BoHV-5 dos quais apenas dois (8E11 e 3B2) reagiram com a cepa BoHV-5 sendo tal reação revelada pelo teste de imunoperoxidase (IPX). A última etapa deste trabalho referiu-se à construção de um plasmídeo recombinante para a expressão da proteína gG126 do envelope da cepa A (BoHV-1). Os primers desenhados foram amplificados, clonados e expresso em E. coli. A atividade da proteína produzida foi testada frente a soros bovinos positivos, hiperimunes e negativos contra BoHV-1. Soros hiperimune e AcMc anti-BoHV-5 também foram testados. A proteína recombinante mostrou reatividade frente aos soros bovinos positivos e hiperimune anti-BoHV-1, bem como ao soro hiperimune anti-BoHV-5. No entanto, não foi reconhecida quando submetida a soro anti-BoHV-1 negativo e anticorpos monoclonais anti-BoHV-5. Conclui-se, a partir dos resultados obtidos, que as técnicas moleculares são importantes ferramentas para caracterização de cepas de BoHV-1 e BoHV-5. Além disso, os AcMc anti-BoHV-5 e a proteína recombinante gG126 do BoHV-1 produzidos representam potenciais insumos para o desenvolvimento de testes diagnósticos visando estratégias futuras para o controle e prevenção das infecções pelos herpesvírus destes tipos. | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Palavras-chave: dc.subject | Teses | - |
Título: dc.title | Produção de insumos para imunodiagnóstico de herpesvírus bovino 1 e 5 | - |
Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo |
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