Sequenciamento e sub-clonagem do gene recX de Herbaspirillum seropedicae

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Autor(es): dc.contributorSteffens, Maria Berenice Reynaud, 1963-2021-
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas-
Autor(es): dc.creatorGalvao, Carolina Weigert-
Data de aceite: dc.date.accessioned2025-09-01T12:39:12Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2025-09-01T12:39:12Z-
Data de envio: dc.date.issued2022-08-22-
Data de envio: dc.date.issued2022-08-22-
Data de envio: dc.date.issued1999-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/32780-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/32780-
Descrição: dc.descriptionOrientadora: Maria B. R. Steffens-
Descrição: dc.descriptionMonografia (Bacharelado) - Universidade federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias Biológicas-
Descrição: dc.descriptionResumo : o gene recA de H. seropedicae, contido em um fragmento de 4,5 kb EcoRI, no plasmídeo pBMR5, hibridizou com o gene recA de E. coli K12. Dois fragmentos, 3,6 kb Hindlll e 0,7 kb EcoRIIHindlll, contidos no fragmento de 4,5 kb EcoRI, foram subclonados separadamente nos vetores pTZ18R e pTZ19R, originando os plasmídeos pBMR503 e pBMR19, respectivamente. O seqüenciamento total do DNA inserto do pBMR19 e o parcial do pBMR503 produziu uma seqüência contínua de bases, que, quando submetida a comparações no banco de dados, revelou homologia com a proteína RecX de diversos organismos. A seqüência do gene recX de H. seropedicae está depositada no Genbank sob o número de acesso AF084045. No intuito de expressar a proteína RecX, foram construídos primers, que, além de conterem bases complementares a região 5' e 3' do gene, apresentavam sítios de restrição adequados para posterior clonagem em vetor de expressão. O plasmídeo pBMR5 foi utilizado como DNA molde na reação de amplificação que originou fragmentos com tamanhos variados. Os fragmentos foram utilizados como DNA-inserto na ligação com o vetor pTZ19R. Após várias análises dos clones resultantes da ligação, dois plasmídeos, pCWG3 e pGWG10, por apresentaram insertos com o tamanho esperado, 0,5kb, foram isolados e serão submetidos ao seqüenciamento. Os resultados obtidos confirmam a presença do gene recX, organizado de forma contígua ao gene recA, e indicam a possível clonagem do gene recX de H. seropedicae no vetor pTZ19R-
Formato: dc.format1 recurso online : PDF.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
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Palavras-chave: dc.subjectHerbaspirillum seropedicae-
Palavras-chave: dc.subjectGenes-
Título: dc.titleSequenciamento e sub-clonagem do gene recX de Herbaspirillum seropedicae-
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