Clonagem e expressao do gene ginZ de Azospirillum brasilense

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Autor(es): dc.contributorChubatsu, Leda Satie, 1966--
Autor(es): dc.contributorUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas-
Autor(es): dc.creatorAraujo, Mariana Schenato-
Data de aceite: dc.date.accessioned2025-09-01T12:35:39Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2025-09-01T12:35:39Z-
Data de envio: dc.date.issued2022-09-02-
Data de envio: dc.date.issued2022-09-02-
Data de envio: dc.date.issued2000-
Fonte completa do material: dc.identifierhttps://hdl.handle.net/1884/32287-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/1884/32287-
Descrição: dc.descriptionOrientadoa: Leda Satie Chubatsu-
Descrição: dc.descriptionMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias Biológicas-
Descrição: dc.descriptionResumo : O nitrogênio é um elemento essencial para todos os organismos. As plantas são incapazes de assimilar o nitrogênio atmosférico mas podem metabolizar amônia. Azospirillum brasilense é uma bactéria fixadora de nitrogênio encontrada em associação com a raiz de diversas plantas de interesse agrícola como milho, trigo, sorgo e arroz. O processo da fixação biológica do nitrogênio, caracterizado pela redução do dinitrogênio atmosférico a amônia, é altamente regulado tanto a nível da síntese quanto da atividade do complexo enzimático. Uma das proteínas envolvidas na cascata de regulação da fixação de nitrogênio é a PII ou GlnB, produto do gene glnB. A proteína GlnZ ou PZ, produto do gene glnZ, é uma paráloga de PII; PII e GlnZ possuem alta similaridade (66% identidade e 92% similaridade) porém funções celulares distintas. A fim de caracterizar a proteína PZ, o gene glnZ foi amplificado por peR a partir do DNA genômico de Azospirillum brasilense e oligonucleotídeos sintetizados a partir da seqüência do gene depositada no banco de dados GenBank. O fragmento amplificado foi clonado no vetor de expressão pT7-7, resultando no plasmídeo recombinante pMSA-L 1, e no vetor pTZ19R, originando o plasmídeo recombinante pMSA-2. O inserto presente nos dois vetores foi sequenciado e apresentou 100% de identidade com o gene glnZ de A. brasilense depositado no banco de dados. Testes de solubilidade foram realizados com a proteína GlnZ que encontrou-se tanto na fração solúvel quanto na insolúvel do extrato celular das bactérias transformadas com o plasmídeo pMSA-L 1. Após indução com lactose ou IPTG, a proteína GlnZ de A. brasilense foi superexpressa na sua forma nativa em E. coli estirpes BL21 (DE3)pLysS e RB9065(DE3).-
Formato: dc.format1 recurso online : PDF.-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
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Palavras-chave: dc.subjectAzospirillum brasilense-
Título: dc.titleClonagem e expressao do gene ginZ de Azospirillum brasilense-
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