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Metadados | Descrição | Idioma |
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Autor(es): dc.contributor | Klassen, Giseli, 1966- | - |
Autor(es): dc.contributor | Cavalieri, Edneia Amancio de Souza Ramos, 1981- | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | - |
Autor(es): dc.creator | Pereira, Isabela Tiemy | - |
Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-09-01T11:11:47Z | - |
Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-09-01T11:11:47Z | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-09-19 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-09-19 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2012 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/1884/31537 | - |
Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/31537 | - |
Descrição: dc.description | Orientadora: Giseli Klassen | - |
Descrição: dc.description | Coorientadora: Edneia Amancio de Souza Ramos Cavalieri | - |
Descrição: dc.description | Monografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | - |
Descrição: dc.description | Resumo : O câncer de mama é o segundo tipo de câncer mais frequente no mundo e a principal causa de morte entre as mulheres. Alterações na regulação da expressão gênica por eventos epigenéticos são mecanismos comuns neste tipo de câncer. MMP14 e MMP2 são enzimas pertencentes ao grupo das metaloproteases, capazes de degradar o colágeno, um dos principais constituintes da matriz extracelular. Sua função é amplamente descrita por atuar no mecanismo de metástases em diversos tipos de câncer. Dados recentes demonstraram que a linhagem tumoral de mama MCF7 possui o gene MMP2 regulado por metilação do DNA. O objetivo deste trabalho foi avaliar o perfil de metilação do promotor dos genes MMP14 e MMP2 em um painel de linhagens tumorais para posterior aplicação dos resultados em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP (methylation specific PCR). Para isso, amostras de DNA foram isoladas das linhagens tumorais MDA-MB-231, MDAMB-435, MCF7 e HB4a (linhagem controle normal) e tratadas com bissulfito de sódio. A ilha de CpG contendo 383 pares de bases do promotor do gene MMP2 das linhagens foi amplificada por PCR, purificada em gel de agarose 1%, ligada ao vetor pGEMT®easy e eletroporado em estirpe de E. coli DH10B. Oito clones recombinantes para cada linhagem foram selecionados por a-complementação, confirmados por PCR, purificados e submetidos à técnica de sequenciamento utilizando Big Dye Terminator v3.1. Não foi possível a amplificação concomitante das ilhas de CpG do gene MMP14, e novos iniciadores devem ser planejados. Os resultados mostraram que a linhagem normal HB4a, que expressa o gene MMP2, apresentou 18,1% de metilação global enquanto as linhagens tumorais que não expressam MMP2, MCF7 e MDA-MB-231, mostraram 87,7% e 86,2% de metilação global, respectivamente. O perfil de metilação das linhagens tumorais permitiu planejar a localização dos iniciadores para a técnica de MSP capazes de distinguir as amostras metiladas das não metiladas. Entretanto, a reações de PCR utilizando esses iniciadores não ocorreram como esperado. Por isso, em continuidade ao estudo foi realizada a clonagem e o sequenciamento da ilha de CpG do gene MMP2 a partir de amostras de tumores primários de mama sendo que uma das amostras com expressão positiva da proteína MMP2 apresentou-se altamente metilado (92,8%). Portanto, podemos concluir que a metilação do DNA pode não ser o único mecanismo epigenético de regulação do gene MMP2. Os resultados obtidos demonstram que o gene MMP2 não pode ser avaliado por MSP em amostras de tumores devido a sua heterogeneidade no perfil de metilação, não correspondente à expressão do gene. Resultados como esse ainda não foram descritos na literatura e farão parte de novos estudos para compreensão do envolvimento de MMP2 no câncer de mama. | - |
Formato: dc.format | 1 recurso online : PDF. | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Relação: dc.relation | Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader | - |
Palavras-chave: dc.subject | Mamas - Câncer | - |
Palavras-chave: dc.subject | Epigenética | - |
Palavras-chave: dc.subject | Metilação de DNA | - |
Título: dc.title | Análise do perfil de metilação dos genes MMP2 e MMP14 em linhagens tumorais de mama e em tumores primários de mama utilizando a técnica de MSP | - |
Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo |
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