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Metadados | Descrição | Idioma |
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Autor(es): dc.contributor | Pedrosa, Fabio O., 1947- | - |
Autor(es): dc.contributor | Wassem, Roseli | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciências (Bioquímica) | - |
Autor(es): dc.creator | Castellen, Patrícia | - |
Data de aceite: dc.date.accessioned | 2019-08-21T22:59:37Z | - |
Data de disponibilização: dc.date.available | 2019-08-21T22:59:37Z | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2019-02-21 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2019-02-21 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2005 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/1884/2321 | - |
Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/1884/2321 | - |
Descrição: dc.description | Orientador : Fabio de Oliveira Pedrosa | - |
Descrição: dc.description | Co-orientadora : Roseli Wassem | - |
Descrição: dc.description | Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica. Defesa: Curitiba, 2005 | - |
Descrição: dc.description | Inclui bibliografia | - |
Descrição: dc.description | Resumo: A fixação biológica de nitrogênio é a redução do nitrogênio atmosférico a amônio, catalisado pela nitrogenase. O metabolismo de nitrogênio é controlado por um complexo sistema regulatório denominado ntr, do qual fazem parte as proteínas PII e glutamina sintetase (GS). Em Azospirillum brasilense, a proteína GlnB (produto do gene glnB) atua como sinalizador dos níveis intracelulares de amônio, controlando a atividade de NifA, a qual é responsável pela ativação dos genes envolvidos na síntese do complexo da nitrogenase. A GS, produto do gene glnA, participa do sistema de assimilação do nitrogênio fixado, catalisando a síntese de glutamina, utilizando como substrato glutamato e amônio. O operon glnBA de A. brasilense foi identificado no plasmídeo pAB441, que foi isolado a partir de uma biblioteca genômica. Em experimentos de complementação genética com estirpes NifC de A. brasilense (HM26, HM053 e HM210) realizados por Vitorino (2001), observou-se que a presença do plasmídeo pAB441 leva a uma repressão completa da nitrogenase nestes mutantes, tanto na presença quanto na ausência de amônio. Com o objetivo de identificar os genes responsáveis por tal efeito foi construída uma biblioteca genômica do plasmídeo pAB441. Os insertos dos clones foram sequenciados e a análise da seqüência permitiu a identificação de dezessete ORF's na região do inserto do plasmídeo pAB441. Regiões deste inserto, exceto a região central, entre os sítios de restrição SacI/PstI, foram sub-clonadas para determinar seu efeito sobre a atividade da nitrogenase dos mutantes HM. Estas clonagens foram feitas em vetor estável em A. brasilense e a atividade de nitrogenase foi determinada nos mutantes contendo tais plasmídeos. Uma vez que o fenótipo NifC dos mutantes pode ser decorrente de mutações nos genes glnBA, este operon foi parcialmente seqüenciado nestas linhagens. Nas linhagens HM26 e HM210 foi detectada uma transversão C?T que levou à troca de uma glicina por cisteína na GS destes mutantes. Na HM26 a troca de aminoácido ocorreu na posição 53, correspondente ao sítio de ligação a amônio da GS enquanto na HM210 a troca deu-se na posição 129, o sítio de coordenação de íons metálicos. Ambas as mutações podem ser responsáveis pela baixa atividade biossintética de GS observada nestes mutantes. | - |
Formato: dc.format | 98f. : il. algumas color. | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Formato: dc.format | application/pdf | - |
Relação: dc.relation | Disponível em formato digital | - |
Palavras-chave: dc.subject | Teses | - |
Palavras-chave: dc.subject | Bioquímica | - |
Palavras-chave: dc.subject | Nitrogênio - Fixação | - |
Palavras-chave: dc.subject | Azospirillum brasilense | - |
Título: dc.title | Análise estrutural e funcional da região gInBA de Azospirillum brasilense | - |
Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Rede Paraná Acervo |
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