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| Metadados | Descrição | Idioma |
|---|---|---|
| Autor(es): dc.contributor | Pavarina, Ana Claudia | - |
| Autor(es): dc.contributor | Universidade Estadual Paulista (UNESP) | - |
| Autor(es): dc.creator | Bellini, Amanda | - |
| Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-08-21T20:30:14Z | - |
| Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-08-21T20:30:14Z | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2025-08-04 | - |
| Data de envio: dc.date.issued | 2022-06-03 | - |
| Fonte completa do material: dc.identifier | https://hdl.handle.net/11449/312665 | - |
| Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/11449/312665 | - |
| Descrição: dc.description | A terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) promove a inativação de Candida albicans em suspensão, entretanto, a completa inativação do fungo em biofilmes ainda não foi observada. A tolerância de C. albicans em biofilme é multifatorial e tem sido associada a fatores como o efeito protetor da matriz extracelular (MEC) do biofilme que dificulta a penetração de antifúngicos e outros fármacos. Dessa forma, esse estudo avaliou a influência da MEC na susceptibilidade de C. albicans em biofilme à aPDT, mediada por Photoditazine® (PDZ) associado ao diodo emissor de luz (LED). Foram formados biofilmes de C. albicans (ATCC 90028). Após 48 horas, todos os biofilmes foram submetidos às seguintes condições de tratamento: I) aPDT [os biofilmes foram incubados por 20 minutos com PDZ (25 mg/L) e iluminados com LED (660 nm, 18 J/cm2); n=6]; II) DNase+aPDT [os biofilmes foram incubados por 5 minutos com DNase I (20 unidades/mL) e submetidos à aPDT; n=6]; III) sonicação+aPDT [os biofilmes foram sonicados por 30 segundos (7 W 170 a 190 J) e submetidos à aPDT; n-6]; ou IV) DNase+sonicação+aPDT [os biofilmes foram incubados com DNase I, sonicados e submetidos à aPDT; n=6]. A seguir, nos biofilmes remanescentes foram realizadas dez aplicações sucessivas de aPDT. Os seguintes métodos foram utilizados para avaliar a eficácia das diferentes estratégias de tratamentos sobre os biofilmes: contagem de unidades formadoras de colônias (UFC), quantificação do peso seco (total e insolúvel), das proteínas solúveis e insolúveis, análise de polissacarídeos solúveis em água (WSP), polissacarídeos solúveis em álcali (ASP), DNA extracelular (eDNA) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Foram utilizados os testes de Shapiro-Wilk, Levene e ANOVA two-way, com nível de significância de 5%. Os resultados de UFC foram avaliados após cada uma das aplicações e de componentes da MEC foram quantificados após as aplicações 1, 5 e 10. Os resultados demonstraram redução na viabilidade celular em todas as condições, a maior redução (5,7 log10) foi observada na décima aplicação da condição I (aPDT). Não houve diferença significativa nos valores de peso seco total, peso seco insolúvel e ASP em nenhuma condição experimental. Foi observada redução dos valores de proteínas solúveis após quinta e décima aplicações (p<0,001) em todas as condições e dos valores de proteínas insolúveis somente após a primeira aplicação nas condições I e IV (p<0,001). Os valores de WSP e eDNA apresentados após os tratamentos foram significativamente menores quando comparados ao grupo controle (P-L-; p<0,001) em todas as condições experimentais. A MEV demonstrou aparecimento de deformidades nas paredes celulares e redução no número de células e aglomerados celulares. As estratégias avaliadas para desestruturação do biofilme não aumentaram a susceptibilidade de C. albicans à aPDT. | - |
| Descrição: dc.description | Antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) promotes the inactivation of Candida albicans in suspension, however, complete inactivation of fungus in biofilms has not yet been observed. The tolerance of C. albicans biofilms is multifactorial and has been associated with factors such as the protective effect of the extracellular matrix (ECM) of the biofilm, making it difficult for antifungals and other drugs to penetrate. Thus, this study evaluated the influence of ECM on the susceptibility of C. albicans biofilms to aPDT, mediated by Photoditazine® (PDZ) associated with light-emitting diode (LED). Biofilms of C. albicans strain (ATCC 90028) were formed. After 48 hours, biofilms were submitted to the following treatment conditions: I) aPDT [biofilms were incubated for 20 minutes with PDZ (25mg/L) and illuminated with LED (660 nm, 18 J/cm2 ); n=6]; II) DNase+aPDT [biofilms were incubated for 5 minutes with DNase I (20 units/mL) and subimitted to aPDT; n=6]; III) sonication+aPDT [biofilms were sonicated for 30 seconds (7 W 170 to 190 J) and submitted to aPDT; n=6]; or IV) DNase+sonication+aPDT [biofilms were incubated with DNase I, sonicated and submitted to aPDT; n=6]. After, ten successive applications of aPDT were performed on the remaining biofilms. The following methods were used to evaluate the effectiveness of different strategies on biofilms: colony forming units count (CFU), quantification of dry weight (total and insoluble), soluble and insoluble proteins, analysis of water-soluble polysaccharides (WSP), alkali-soluble polysaccharides (ASP), extracellular DNA (eDNA) and Scanning Electron Microscopy (SEM). The Shapiro-Wilk, Levene and two-away ANOVA tests were used, with significance level of 5%. CFU results were evaluated after each application and ECM components were quantified after applications 1, 5 and 10. The results showed cell viability reduction in all experimental conditions, the greatest reduction (5.7 log10) was observed in tenth application of condition I (aPDT). There was no significant difference in the values of total dry weight, insoluble dry weight and ASP in any experimental condition. A reduction in values of soluble protein was observed after the fifth and tenth applications (p<0.001) in all conditions and in values of insoluble proteins only after the first application under conditions I and IV (p<0.001). The WSP and eDNA values presented after the treatments were significantly lower when compared to the control group (P-L-; p<0.001) in all experimental conditions. SEM showed the appearance of deformities in the cell walls and a reduction in the number of cells and cell slusters. The strategies evaluated for biofilm disruption did not increase the susceptibility of C. albicans to aPDT. | - |
| Descrição: dc.description | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) | - |
| Descrição: dc.description | Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) | - |
| Descrição: dc.description | CAPES: 001 | - |
| Descrição: dc.description | FAPESP: 2013/07276-1 | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Formato: dc.format | application/pdf | - |
| Idioma: dc.language | pt_BR | - |
| Publicador: dc.publisher | Universidade Estadual Paulista (UNESP) | - |
| Direitos: dc.rights | info:eu-repo/semantics/restrictedAccess | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Candida albicans | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Biofilmes | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Matriz extracelular | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Fotoquimioterapia | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Candida albicans | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Biofilms | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Extracellular matrix | - |
| Palavras-chave: dc.subject | Photochemotherapy | - |
| Título: dc.title | Influência da matriz extracelular na susceptibilidade de Candida albicans em biofilme após sucessivas aplicações de terapia fotodinâmica antimicrobiana | - |
| Título: dc.title | Influence of the extracellular matrix on the susceptibility of Candida albicans in biofilm after successive applications of antimicrobial photodynamic therapy | - |
| Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
| Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Unesp | |
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