Atenção:
O eduCAPES é um repositório de objetos educacionais, não sendo responsável por materiais de terceiros submetidos na plataforma. O usuário assume ampla e total responsabilidade quanto à originalidade, à titularidade e ao conteúdo, citações de obras consultadas, referências e outros elementos que fazem parte do material que deseja submeter. Recomendamos que se reporte diretamente ao(s) autor(es), indicando qual parte do material foi considerada imprópria (cite página e parágrafo) e justificando sua denúncia.
Caso seja o autor original de algum material publicado indevidamente ou sem autorização, será necessário que se identifique informando nome completo, CPF e data de nascimento. Caso possua uma decisão judicial para retirada do material, solicitamos que informe o link de acesso ao documento, bem como quaisquer dados necessários ao acesso, no campo abaixo.
Todas as denúncias são sigilosas e sua identidade será preservada. Os campos nome e e-mail são de preenchimento opcional. Porém, ao deixar de informar seu e-mail, um possível retorno será inviabilizado e/ou sua denúncia poderá ser desconsiderada no caso de necessitar de informações complementares.
Metadados | Descrição | Idioma |
---|---|---|
Autor(es): dc.contributor | Universidade Estadual Paulista (UNESP) | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) | - |
Autor(es): dc.contributor | Innovation Institute for Biotechnology | - |
Autor(es): dc.creator | Jacobus, Ana P. | - |
Autor(es): dc.creator | Barreto, Joneclei A. | - |
Autor(es): dc.creator | De Bem, Lucas S. | - |
Autor(es): dc.creator | Menegon, Yasmine A. | - |
Autor(es): dc.creator | Fier, Ícaro | - |
Autor(es): dc.creator | Bueno, João G. R. | - |
Autor(es): dc.creator | Dos Santos, Leandro V. | - |
Autor(es): dc.creator | Gross, Jeferson | - |
Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-08-21T16:15:11Z | - |
Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-08-21T16:15:11Z | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2023-07-29 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2023-07-29 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-11-17 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | http://dx.doi.org/10.1021/acssynbio.2c00348 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | http://hdl.handle.net/11449/246154 | - |
Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/11449/246154 | - |
Descrição: dc.description | Most CRISPR/Cas9 applications in yeast rely on a plasmid-based expression of Cas9 and its guide RNA (gRNA) containing a 20-nucleotides (nts) spacer tailored to each genomic target. The lengthy assembly of this customized gRNA requires at least 3-5 days for its precloning in Escherichia coli, purification, validation, and cotransformation with Cas9 into a yeast strain. Here, we constructed a series of 12 EasyGuide plasmids to simplify CRISPR/Cas9 applications in Saccharomyces cerevisiae. The new vectors provide templates for generating PCR fragments that can assemble up to six functional gRNAs directly into yeasts via homologous recombination between the 20-nts spacers. By dispensing precloning in E. coli, yeast in vivo gRNA assembly significantly reduces the CRISPR/Cas9 experimental workload. A highly efficient yeast genome editing procedure, involving PCR amplification of gRNAs and donors, followed by their transformation into a Cas9-expressing strain, can be easily accomplished through a quick protocol. | - |
Descrição: dc.description | Institute for Bioenergy Research Sao Paulo State University, São Paulo | - |
Descrição: dc.description | Ph.D. Program in Bioenergy Sao Paulo State University, São Paulo | - |
Descrição: dc.description | Genetics and Molecular Biology Graduate Program Institute of Biology University of Campinas | - |
Descrição: dc.description | SENAI Innovation Institute for Biotechnology | - |
Descrição: dc.description | Institute for Bioenergy Research Sao Paulo State University, São Paulo | - |
Descrição: dc.description | Ph.D. Program in Bioenergy Sao Paulo State University, São Paulo | - |
Formato: dc.format | 3886-3891 | - |
Idioma: dc.language | en | - |
Relação: dc.relation | ACS Synthetic Biology | - |
???dc.source???: dc.source | Scopus | - |
Palavras-chave: dc.subject | CRISPR/Cas9 | - |
Palavras-chave: dc.subject | EasyGuide plasmids | - |
Palavras-chave: dc.subject | genome editing | - |
Palavras-chave: dc.subject | gRNA cloning | - |
Palavras-chave: dc.subject | in vivo cloning | - |
Palavras-chave: dc.subject | Saccharomyces cerevisiae | - |
Título: dc.title | EasyGuide Plasmids Support in Vivo Assembly of gRNAs for CRISPR/Cas9 Applications in Saccharomyces cerevisiae | - |
Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Unesp |
O Portal eduCAPES é oferecido ao usuário, condicionado à aceitação dos termos, condições e avisos contidos aqui e sem modificações. A CAPES poderá modificar o conteúdo ou formato deste site ou acabar com a sua operação ou suas ferramentas a seu critério único e sem aviso prévio. Ao acessar este portal, você, usuário pessoa física ou jurídica, se declara compreender e aceitar as condições aqui estabelecidas, da seguinte forma: