Clonagem, expressão e imunogenicidade Leptospira interrogans contendo domínios repetidos de leucina

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MetadadosDescriçãoIdioma
Autor(es): dc.contributorSforcin, José Maurício-
Autor(es): dc.contributorUniversidade Estadual Paulista (UNESP)-
Autor(es): dc.creatorInácio, João Pedro Gaspar-
Data de aceite: dc.date.accessioned2025-08-21T18:12:50Z-
Data de disponibilização: dc.date.available2025-08-21T18:12:50Z-
Data de envio: dc.date.issued2022-10-26-
Data de envio: dc.date.issued2022-10-26-
Data de envio: dc.date.issued2022-10-23-
Fonte completa do material: dc.identifierhttp://hdl.handle.net/11449/237259-
Fonte: dc.identifier.urihttp://educapes.capes.gov.br/handle/11449/237259-
Descrição: dc.descriptionEspiroquetas patogênicas do gênero Leptospira são o agente causador da leptospirose, uma zoonose amplamente disseminada. Leptospiras patogênicas colonizam os túbulos renais de animais e humanos, sendo excretadas via urina no ambiente. O homem é o hospedeiro acidental e terminal da doença, e pode apresentar um quadro variado de manifestações clínicas. Anualmente, cerca de 1 milhão de pessoas são acometidas pela doença no mundo, resultando em aproximadamente 60 mil mortes. A habilidade das leptospiras de cruzar rapidamente as barreiras do hospedeiro e causar infecção ainda não é totalmente compreendida. Assim, entender os mecanismos de patogenicidade é importante para combater sua ação. As proteínas presentes na membrana externa das leptospiras são alvos interessantes de estudo, pois devido a sua localização, são as primeiras estruturas a interagir com o hospedeiro. Proteínas LRR (Leucine Rich Repeat) são caracterizadas pela presença de múltiplas regiões contendo resíduos de leucina e apresentam funções relacionadas às interações patógeno-hospedeiro. Além disso, análises in silico sugerem que a maioria das proteínas LRR de leptospiras são extracelulares. Desse modo, o presente estudo teve como objetivo clonar, expressar e purificar a lic11098, uma proteína LRR de L. interrogans sorovar Copenhageni e avaliar suas propriedades imunogênicas. As análises in silico realizadas apontaram a proteína alvo como sendo extracelular e possuindo apenas domínios LRR. A modelagem computacional mostrou que a proteína é rica em α-hélices e folhas-β. A análise de conservação da proteína dentro do gênero Leptospira evidenciou sua conservação entre espécies patogênicas, o que pode elegê-la como um potencial candidato vacinal. A sequência de DNA que codifica a proteína LRR de L. interrogans foi clonada no vetor pAE, expressa em Escherichia coli e purificada sem mutações na concentração de 0,94 mg/mL. O resultado do dicroísmo circular mostrou que a proteína recombinante é composta 31,3% de α-hélices, 54,5% de folhas-β e apenas 14,2% de estrutura irregular, denotando abundância de estrutura secundária, importante para a caracterização funcional. Foi avaliada a interação da LRR recombinante com o soro de pacientes diagnosticados com leptospirose. Os resultados evidenciaram que a proteína recombinante não se mostra eficaz como um candidato diagnóstico, por apresentar baixa sensibilidade de detectar anticorpos contra o patógeno nas fases inicial e convalescente da doença. Por fim, camundongo BALB/c foram imunizados com a lic11098 para obtenção de soros policlonais. A proteína mostrou-se altamente imunogênica, produzindo altos títulos de anticorpos.-
Descrição: dc.descriptionConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)-
Descrição: dc.descriptionCNPq: 153617/2022-5-
Formato: dc.formatapplication/pdf-
Idioma: dc.languagept_BR-
Publicador: dc.publisherUniversidade Estadual Paulista (UNESP)-
Direitos: dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/restrictedAccess-
Palavras-chave: dc.subjectLeptospirose-
Palavras-chave: dc.subjectBiotecnologia-
Palavras-chave: dc.subjectImunologia-
Título: dc.titleClonagem, expressão e imunogenicidade Leptospira interrogans contendo domínios repetidos de leucina-
Título: dc.titleCloning, expression and immunogenicity of a Leptospira interrogans protein containing leucine rich repeat domains-
Tipo de arquivo: dc.typelivro digital-
Aparece nas coleções:Repositório Institucional - Unesp

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