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Metadados | Descrição | Idioma |
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Autor(es): dc.contributor | IPEN–CNEN | - |
Autor(es): dc.contributor | Biosintesis P & D | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Estadual Paulista (UNESP) | - |
Autor(es): dc.contributor | Instituto Butantan | - |
Autor(es): dc.contributor | Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) | - |
Autor(es): dc.creator | Oliveira, João E. | - |
Autor(es): dc.creator | Suzuki, Miriam F. | - |
Autor(es): dc.creator | Damiani, Renata | - |
Autor(es): dc.creator | Lima, Eliana R. | - |
Autor(es): dc.creator | Amaral, Kleicy C. | - |
Autor(es): dc.creator | Santos, Anderson M. S. | - |
Autor(es): dc.creator | Magalhães, Geraldo S. | - |
Autor(es): dc.creator | Faverani, Leonardo P. | - |
Autor(es): dc.creator | Pereira, Luís A. V. D. | - |
Autor(es): dc.creator | Bartolini, Paolo | - |
Data de aceite: dc.date.accessioned | 2025-08-21T17:46:18Z | - |
Data de disponibilização: dc.date.available | 2025-08-21T17:46:18Z | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-04-28 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2022-04-28 | - |
Data de envio: dc.date.issued | 2021-11-30 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | http://dx.doi.org/10.3390/cells10123525 | - |
Fonte completa do material: dc.identifier | http://hdl.handle.net/11449/223080 | - |
Fonte: dc.identifier.uri | http://educapes.capes.gov.br/handle/11449/223080 | - |
Descrição: dc.description | Human BMP-2, a homodimeric protein that belongs to the TGF-β family, is a recognized osteoinductor due to its capacity of inducing bone regeneration and ectopic bone formation. The administration of its recombinant form is an alternative to autologous bone grafting. A variety of E. coli-derived hBMP-2 has been synthesized through refolding of cytoplasmic inclusion bodies. The present work reports the synthesis, purification, and characterization of periplasmic hBMP-2, obtained directly in its correctly folded and authentic form, i.e., without the initial methionine typical of the cytoplasmic product that can induce undesired immunoreactivity. A bacterial expression vector was constructed including the DsbA signal peptide and the cDNA of hBMP-2. The periplasmic fluid was extracted by osmotic shock and analyzed via SDS-PAGE, Western blotting, and reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC). The purification was carried out by heparin affinity chromatography, followed by high-performance size-exclusion chromatography (HPSEC). HPSEC was used for qualitative and quantitative analysis of the final product, which showed >95% purity. The classical in vitro bioassay based on the induction of alkaline phosphatase activity in myoblastic murine C2C12 cells and the in vivo bioassay consisting of treating calvarial critical-size defects in rats confirmed its bioactivity, which matched the analogous literature data for hBMP-2. | - |
Descrição: dc.description | Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) | - |
Descrição: dc.description | Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares IPEN–CNEN, Av. Prof. Lineu Prestes 2242 | - |
Descrição: dc.description | Biosintesis P & D | - |
Descrição: dc.description | Department of Surgery and Integrated Clinic School of Dentistry Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho UNESP | - |
Descrição: dc.description | Immunopathology Laboratory Instituto Butantan | - |
Descrição: dc.description | Department of Biochemistry and Tissue Biology Institute of Biology State University of Campinas UNICAMP | - |
Descrição: dc.description | Department of Surgery and Integrated Clinic School of Dentistry Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho UNESP | - |
Descrição: dc.description | FAPESP: 2015/15446-0 | - |
Descrição: dc.description | FAPESP: 2016/24724-6 | - |
Idioma: dc.language | en | - |
Relação: dc.relation | Cells | - |
???dc.source???: dc.source | Scopus | - |
Palavras-chave: dc.subject | Calvarial critical-size defect | - |
Palavras-chave: dc.subject | HBMP-2 | - |
Palavras-chave: dc.subject | Osteoinductor | - |
Palavras-chave: dc.subject | Periplasmic expression | - |
Título: dc.title | Synthesis of human bone morphogenetic protein-2 (Hbmp-2) in e. coli periplasmic space: its characterization and preclinical testing | - |
Tipo de arquivo: dc.type | livro digital | - |
Aparece nas coleções: | Repositório Institucional - Unesp |
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