Chikungunya em Roraima: características moleculares e perfil clínico do vírus isolado no estado no ano de 2015 (Atena Editora)

Abstract

O CHIKV é um arbovírus emergente, membro do gênero Alphavírus e da família Togaviridae, tendo como principal vetor o mosquito Aedes aegypti e como vetor secundário o Aedes albopictus. Desde 2005, circulam simultaneamente e causando epidemias os genótipos: África Ocidental- WA, África Central Sul e Leste – ECSA, Asiático e IOL. O CHIKV é uma pequena partícula esférica medindo cerca de 60 - 70 nm de diâmetro. Possui Ácido Ribonucleico como material genético, constituído de uma única cadeia de RNA de sentido positivo, protegido por um envoltório proteico icosaédrico chamado de capsídeo. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização molecular e determinar o perfil clínico do arbovírus CHIKV circulante no estado de Roraima no ano de 2015. As amostras de soro suspeitas de CHIKV foram submetidas à extração do RNA genômico. Para identificação viral uma qRT-PCR foi usada. Para obtenção de um fragmento de 434pb da região da proteína não estrutural nsp1 do genoma viral foi realizado a RT-PCR convencional usando iniciadores específicos. Os produtos de PCR gerados foram sequenciados, analisados e editados a fim de obter uma sequência consenso. Para análise molecular, as três sequências obtidas foram comparadas com cepas representativas dos quatro genótipos existentes depositadas no banco de dados do GenBank. A árvore filogenética foi construída pelo método de Neighbor-Joinning. As cepas isoladas no estudo se agruparam junto ao genótipo Asiático, formando um subclado com as cepas americanas. As amostras do estudo apresentaram uma similaridade de 99,4% - 100% com as cepas Asiáticas extraídas do GenBank. Foram encontradas três substituições de nucleotídeos por transição na posição 333 C→T, 351 C→T e 369 G→A, além de uma única substituição por transversão na posição 340 sendo de A→T em uma única amostra (15/116RR), que resultou em trocas de aminoácidos residuais T118S (Thr → Ser) com caracteristicas bioquimicamente semelhantes. Esses dados indicam que as cepas de CHIKV isolados em Roraima apresentam aminoácidos altamente conservados. Dentre as características clínicas, os sintomas mais frequentes identificados no estudo foram febre (100%), cefaleia (95,7%), artralgia (73,9%) e mialgia (65,2%). A artralgia se localizou principalmente nas pequenas articulações dos membros inferiores e superiores, que retornou acontecer em 33,3% dos pacientes em cerca de 45 dias após a fase aguda da doença. Os resultados indicam a presença do genótipo Asiático circulando no estado de Roraima e demonstram características clínicas semelhantes ao relatado em literatura.